瘦素对载脂蛋白M表达的影响和其机制研究.pdf

瘦素在体内外对载脂蛋白 M 表达及分泌的影响 中文摘要 瘦素对载脂蛋白 M 表达的影响及其机制研究 中文摘要 第一部分 瘦素在正常大鼠体内对载脂蛋白 M 表达和分泌的影响 目 的：构建大鼠尾静脉注射模型，研究瘦素（leptin）在正常大鼠体内对载脂 蛋白 M（apoM）表达及分泌的影响。 方 法：健康成年 SD 雄性大鼠，采取尾静脉注射方式分别泵入生理盐水和 50ng/ml leptin，泵速设为 2.5ml/h，持续 6hrs。分别检测大鼠血糖、胰岛素、总胆固醇（TC）、 总甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C） 水平。RT-PCR 方法检测大鼠肝脏 apoM、apoB、LDL-R 及 apoAI 表达的变化，dot-blotting 方法血清 ApoM 的变化。 结 果：尾静脉置管连续输入 50ng/ml leptin 6hrs 后，SD 大鼠肝脏 apoM mRNA 水平下降 55.15%（P=0.0159），apoB 和 LDL mRNA 水平分别下降 48.60% （P=0.0079） 及 40. 43%（P=0.0159），apoAI 表达增加 149%（P=0.0079），而血清 apoM 水平则无 明显统计学差异。尾静脉模型中，50ng/ml leptin 对处理组大鼠血清胰岛素水平较对照 组下降 68.82%（P=0.0317），而血糖增加 14.68%（P=0.0079），其他脂蛋白无明显变化。 结 论： leptin 对 apoM 的表达调节可能首先发生在肝脏，肝脏是 leptin 调节 apoM 表达的关键部位。leptin 在体内对 apoM 的表达调节可能与低胰岛素水平和高血糖水 平相关。 关键词：载脂蛋白 M，leptin，胰岛素，低密度脂蛋白受体 第二部分 瘦素在离体肝灌注系统及肝细胞中对载脂蛋白 M 表达的影响 目 的：利用大鼠离体肝灌注模型及人正常细胞株 LO2 细胞，进一步研究 leptin 在肝脏中对 apoM 及相关脂质的表达调节作用。 方 法：健康成年 SD 雄性大鼠肝脏游离后，将肝脏置于灌注装置中。（1）leptin 对离 体肝脏 apoM 表达的影响：??续以 5ml/min 分别泵入培养液（含牛血清白蛋白 30g/L）、 含 10 ng/ml leptin 培养液（含牛血清白蛋白 30g/L）、含 100ng/ml leptin 培养液（含牛 I 中文摘要 瘦素在体内外对载脂蛋白 M 表达及分泌的影响 血清白蛋白 30g/L），分别设立对照组，每组 8 个离体肝灌注模型。持续 6hrs 后取肝 组织标本检测相关指标的 mRNA 水平。（2）人正常细胞株 LO2 细胞经不同浓度 leptin （10ng/ml、100ng/ml、500ng/ml）分别孵育 24hrs 后，检测 apoM mRNA 的表达水平。 结 果：在离体肝灌注模型中，生理浓度 leptin（10ng/ml）对 apoM、apoB、LDLR 表达无明显影响（P0.05），超浓度 leptin 处理组（100ng/ml）能显著上调 apoM、apoB、 LDLR 的表达（P 值分别为 0.029，0