PCR基因扩增资料.ppt

PCR基因扩增 ;一、实验目的;三、实验试剂、材料、仪器 试剂：Taq DNA聚合酶，PCR缓冲液（含MgCl2），dNTP（每种2.5mmol/L）混合物，引物(终浓度各0.5mol/L) ；琼脂糖，50×TAE 缓冲液，无菌双蒸水等 材料：银杏DNA 仪器：微量移液器，吸头，0.2ml PCR薄壁管，PCR仪，台式离心机，琼脂糖凝胶电泳系统，微波炉等;四、操作步骤 1）取一个干净的PCR薄壁管 2）往PCR管里面加入各种试剂： Primer1 1μl Primer2 1μl DNA模板 3μl 10*buffer 3μl dNTP 2μl Taq酶 0.5μl 无菌ddH2O 19.5μl ; 3）设定好PCR反应程序如下： 95℃ 4 min 95℃ 50s 57℃ 1.0min 35 cycles 72℃ 2min 72℃ 10 min End 4）开始PCR 5）1%琼脂糖凝胶电泳检测PCR结果 ;五、注意事项;DNA的结构（1）;DNA的结构（2）;DNA的结构（3）;DNA的复制（1）;DNA的复制（2）;DNA的复制（3）;DNA的复制 和 体外的模拟;PCR循环--变性;PCR循环--变性;PCR循环--变性;PCR循环—退火;PCR循环—延伸;PCR循环—延伸;PCR循环—延伸;PCR循环—延伸;PCR整个过程;讨论1：为何酶促反应需要那么高的温度;讨论2：影响PCR质量的一些因素;讨论3：PCR的应用;讨论3：PCR的应用;PCR技术是现代分子生物学实验技术的一项重要的技术，这一点在你进入分子研究领域你会真切的感受到的——可以说，如果没有PCR仪现代分子实验研究寸步难行！