抗原抗体反应检验系.资料.ppt

;“纲举目张”释义，纲指鱼网上的总绳，目指网眼。把大绳子一提起来，一个个网眼就都张开。比喻抓住事物的关键，带动其他环节。 ; 第七章 抗原抗体反应; 抗原抗体反应;基本概念;抗体: 　是Ｂ细胞识别抗原后活化增殖分化为浆细胞所产生的一类能与相应抗原特异性结合的球蛋白。 ;免疫球蛋白的结构 ;抗体的结构及其多样性;抗原决定簇（epitope） 1．抗原决定簇又称表位（epitope），是指抗原性物质表面决定该抗原特异性的特殊化学基团，是免疫应答和免疫反应具有特异性的物质基础。　　2．抗原决定簇是很小的，其大小相当于相应抗体的结合部位，它们可由5-7个氨基酸、单糖或核苷酸残基组成。　　3．抗原结合价：是指能与抗体分子结合的抗原决定簇的总数。每一种半抗原可理解为单一的抗原决定簇，而天然抗原含有很多不同的抗原决定簇，它是带有大量多种天然半抗原的大分子。;;是抗原和相应抗体之间的特异性结合反应 既可发生在体内,也可发生在体外 ;一、基本原理;抗原抗体反应的二阶段性;二、基本条件： 结合力 亲和力和亲合力 亲水胶体转化为疏水胶体;抗原和抗体的结合是互补性的特异性结合 不形成牢固的共价键，通过非共价键结合 这种弱的结合力涉及几种分子间的作用力 ; 静电引力（库伦引力）; 范德华引力; 概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子 间的引力。 ; 疏水作用力（疏水键）;; 二、抗原抗体亲和力(affinity）;; 亲和常数; K=K1/K2 K:亲和常数 K1:结合常数 K2:解离常数 ;;* 亲合力（avidity) 是指一个抗体分子与整个抗原表位之间结合的强度。 亲合力与亲和力、抗体的结合价和抗原的有 效决定簇数目相关。 亲合力越大，抗原抗体结合越牢固。;; 血清学反应条件下，抗原抗体均带负电荷， 使极化的水分子在其周围形成水化层，成为 亲水胶体。 ; 亲水胶体转化为疏水胶体示意图; 第二节 抗原抗体反应的特点; 一、 特异性（specificity）;; 特异性示意图 ;*交叉反应(cross reaction) 两种不同的抗原 物质具有部分相同或类似结构的抗原决定簇 (共同抗原)，则可与彼此相应的抗体反应。;;*最适比:是指抗原与抗体发生可见反应，需遵循一定的量比关系，只有当二者浓度比例适当时，才出现可见反应。;1:2; 等价带(equivalencezone)抗原与抗体分子比 例合适的范围。; 比例性示意图;; 三、可逆性（reversibility);抗原抗体动态平衡公式;　抗原抗体复合物解离取决于： 抗体对相应抗原的亲合力 环境因素　;环境因素：pH过高过低、高离子强度等。 常用于解离抗原抗体复合物的物质有： 3mol/L硫氰化钾、pH2.4 0.1mol/L甘氨酸、 7mol/L尿素等。 解离后抗原抗体仍保持原有特性。 ;抗体;第一阶段：特异性结合阶段，反应快，不可见 第二阶段：反应可见阶段，反应慢，出现凝集、 沉淀和细胞溶解等现象 ; 第三节 抗原抗体反应影响因素;颗粒性Ag+Ab→凝集反应 可溶性Ag+Ab→沉淀反应 单价抗Ag与Ab→不出现沉淀反应;可溶性抗原 沉淀环反应;一、反应物自身因素 *抗体：1.来源 2.特异性与亲合力 　　　 3.浓度;H型抗体 等价带窄;二、环境条件： *电解质：0.85%NaCl *酸碱度：pH6～9 *温度：15～40℃ 37℃最适 冷凝集4℃;*酸凝集：当pH为3左右时，接近细菌Ag的等电点，可出现非特异性凝集。;;作用时间 抗原抗??反应应有足够的时间，不同反应时间不同。; 第四节 抗原抗体反应类型;反应类型;反应类型;按实际用途分为: ①免疫组织化学技术(immunohistochemistry technique,IHCT) ②免疫测定(immunoassay); 1.等价带 2.前带 3.后带 4.共同抗原 5.交叉反应 6. Ag-Ab反应原理 ７.Ag-Ab反应特点 ８. Ag-Ab反应影响因素 ;1．什么是抗原抗体反应？ 抗原抗体反应的原理是什么？ 2．抗原抗体的结合力有哪些？ 3．抗原抗体反应有哪些特点？ 4．如何理解抗原抗体反应的特异性和交叉反应？ 5．什么是抗原抗体反应的可逆性？有何应用？ 6．如何理解抗原抗体反应的亲和力和亲合力？ 7．抗原抗体反应体系中为何要确定抗原、抗