新一轮基因工程资料.ppt

选修三;2016一轮复习 基因工程 ;基因工程;一、基因工程的原理及技术;2、技术：;一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。（断开的不是氢键）;　;;连接酶的作用是：将互补配对的两个末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。（恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键）;DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？;作用：将外源基因送入受体细胞 条件： （1）能在宿主细胞内复制并稳定地保存 （2）具有一个或多个限制酶切点 （3）具有某些标记基因 （4）载体必须安全，不会对受体细胞有害 种类：质粒、噬菌体和动植物病毒 ;1.细胞染色体外能自主复制的小型环状DNA分子 2.质粒是基因工程中最常用的运载体 3.最常用的质粒是大肠杆菌的质粒 4.存在于许多细菌及酵母菌等生物中 5.质粒的存在对宿主细胞无影响 ;;①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。;;二、基本步骤： 第一步：目的基因的获取 第二步：基因表达载体的构建 第三步：将目的基因导入受体细胞 第四步：目的基因的检测与鉴定;;基因工程的基本操作流程图;取出DNA;①从基因文库获取目的基因 基因组文库（一种生物的所有基因） 部分基因文库：如cDNA文库（部分基因） ②利用PCR技术扩增目的基因 原理：DNA双链复制的原理 ③通过DNA合成仪直接人工合成 根据蛋白质的氨基酸顺序推算出信使RNA核苷酸顺序，然后按照碱激互补配对原则，推算出基因DNA的脱氧核苷酸顺序。用游离脱氧核苷酸直接合成相应的基因。;;※PCR技术扩增与DNA复制的比较;小结：三种目的基因获取方法的前提条件;第二步：基因表达载体的构建;1.用一定的_________切割 质粒，使其出现一个切 口，露出____________。 2.用_____________切断目 的基因，使其产生_____ ____________。;4.过程:;启动子;第三步：将目的基因导入受体细胞;将目的基因导入植物细胞 农杆菌转化法（感染双子叶植物和裸子植物，对大多单子叶植物没有感染力） 基因枪法（常用于单子叶植物） 花粉管通道法（转基因抗虫棉） 将目的基因导入动物细胞 显微注射技术（“超级小鼠”） 将目的基因导入微生物细胞 导入大肠杆菌方法：先用Ca2+处理，使其转为感受态细胞。再将重组载体与感受态细胞混合。 ;抗虫鉴定 抗病鉴定 活性鉴定等;;（2）抗病转基因植物 抗病转基因植物所用的基因： ①常用：病毒外壳蛋白基因和 病毒的复制酶基因 ②抗真菌转基因植物中有：几丁质酶基因和抗毒素合成基因 （3）其它抗逆转基因植物 ①抗盐碱、干旱的基因：调节细胞渗透压的基因 ②抗冻蛋白基因 ③抗除草剂基因 ;2、改良农作物的品质;（二）动物基因工程的应用 1、用于提高动物生长速度 （如：导入外源生长激素基因鲤鱼） 2、用于改善畜产品的品质 （如：将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组，使乳糖的含量大大减低） 3、用转基因动物生产药物 （如：转入人的a-抗胰蛋白基因的绵羊） 4、用转基因动物作器官移植的供体 （如：改造猪的器官） ;（三）基因工程药物;（四）基因治疗;四、蛋白质工程;例子：;（二） 蛋白质工程的基本原理 1、概念： 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质，以满足人类对生产和生活的需求。 ;2、基本原理 ： （1）确定蛋白质的功能→蛋白质应有的高级结构→蛋白质应具备的折叠状态→应有的氨基酸序列→应有的碱基排列， 创造自然界不存在的蛋白质。 （2）其与基因工程的比较： 基因工程是遵循中心法则，从DNA→mRNA→蛋白质→折叠产生功能，生产出自然界已有的蛋白质。 ;3、蛋白质工程的进展和前景;专题二、克隆技术;3、过程： 植物的花瓣（高度分化的组织）;植物组织培养技术的流程简图：;二、动物的细胞培养与体细胞克隆;动物细胞培养过程;动物细胞培养的条件;动物细胞培养技术的应用;2、体细胞克隆;动物核移植的概念;体细胞核移植的过程;体细胞核移植的应用前景;三、细胞融合与单克隆抗体;2、单克隆抗体;单克隆抗体的制备;单克隆抗体的应用;1.植物细胞表现出全能性的必要条件是（ ） A.给予适宜的营养和外界条件 B.导入其他植物细胞的基因 C.脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件 D.将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内;2.用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组 织，其主要原因是这样的组织细胞（　） A.容易产生各种变异　　　　　　　　　 B.具有更强的全能性 C.取材