实训指导材料 -大肠菌群的测定.ppt

;（一）大肠菌群的定义及范围 1.定义 指一群在37℃，24h能发酵乳糖、产酸、产气，需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。; 2.检测范围;大肠菌群生化特性分类表;++阳性 ， －阴性， +/－多数阳性，少数阴性;（二）大肠菌群作为粪便污染指标菌的意义义;（三）食品中大肠菌群的测定; 检 样 ｜ 递增稀释 ｜ 乳糖胆盐发酵管 ｜ ｜ 37℃ 24h ｜ 不产气 产气 ｜ ｜ 大肠菌群阴性 伊红美兰、远腾、MA琼脂等 ｜ ｜ 报告 ｜ 37℃ 24h ｜ 革兰氏染色 乳糖发酵管 ｜ ｜ ｜ ｜ ｜ 37℃ 24h ｜ 革兰氏阳性 革兰氏阴性 不产气 ｜ 无芽孢杆菌 产气 ｜ 大肠菌群阴性 ｜ ｜ 大肠菌群阴性 ｜ ｜ 大肠菌群阳性 报告 ｜ 报告; 2．操作步骤 ; ②用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液lmL，注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇试管混匀，作成1：100的稀释液。另取1ml灭菌吸管，按上顶操作依次作10倍递增稀释液。 每递增一次换一只1ml灭菌吸管。; ③根据食品卫生标准要求或对污染情况的估计，选择三个稀释度，每个稀释度接种3管。也可直接用样品接种。;(2)乳糖发酵试验; (3) 分离培养;（4）证实实验;（5）报告;3．注意事项; 只做一步初发酵，对某些食品来说，误差是比较大的。这样做，会有相当部分的合格样品被作为不合格样品处理，应予注意。 ; (2)抑菌剂; (3)挑选菌落 ; 如果选用伊红美蓝平板为分离培养基，在该平板上，大肠菌群菌落呈黑紫色有光泽或无光泽，检出率最高；红色、粉色菌落检出率较低。菌落形态的其他方面(如菌落大小、光滑与粗糙、边缘完整情况、隆起情况、湿润与干燥等)虽亦应注意，但不如色泽方面更为重要。 ; 另外，挑取菌落数与大肠菌群的检出率有密切关系。 在实际工作中，由于工作量较大，通常只挑取一个菌落，由于机率问题，很难避免假阴性的出现，尤其当菌落呈不典型时。所以挑菌落一定要挑取典型菌落，如无典型菌落则应多挑几个，以免出现假阴性。 ;(4)产气量 ; (5)MPN