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第13章细胞重组及动物克隆技术研究资料

第13章 细胞拆合及动物克隆技术;一、什么是克隆;二、动物克隆;(二)、动物克隆技术 细胞核移植(常用技术) 卵裂球培养移植(胚胎干细胞) 胚胎分割技术 ;三、细胞核移植技术;(二)、细胞核移植技术的发展简史 1938年Hans Spemann首先提出在多细胞动物中实验核移植的设想,目的是证明已分化的细胞核具有发育的全能性。 1952年,美国费城Lankenau医学研究所的Robert Briggs和Thomas King以北美洲的一种豹蛙做实验,成功的产生了克隆蛙。这是人类第一次培养出的细胞核移植蛙。 1963年,我国童第周教授领导的科研组,研究了鱼类胚胎细胞核移植技术,获得成功。 ;1981年卡尔·伊尔门泽和彼得·霍佩用鼠胚胎细胞培育出发育正常的小鼠。 1984年,施特恩·维拉德森用取自羊的未成熟胚胎细胞克隆出一只活产羊,之后产生了牛、猪、山羊、兔和猕猴等各种动物的克隆后代 1997年2月英国罗斯林研究所Wilmut博士科研组公布体细胞克隆羊“多莉”培育成功 1999年底,全世界已有6种类型细胞——胎儿成纤维细胞、乳腺细胞、卵丘细胞、输卵管/子宫上皮细胞、肌肉细胞和耳部皮肤细胞的体细胞克隆后代成功诞生。 2000年6月,中国西北农林科技大学利用成年山羊体细胞克隆出两只“克隆羊 ;中国首次研究成功不同种类克隆动物的报道;细胞核移植技术;核受体(卵母细胞)细胞核的去除方法: 化学处理 紫外线灭活 显微手术:用细胞松弛素处理细胞,然后用 吸管吸取细胞核。 选择处于MⅡ期的卵母细胞 ;供体细胞保持完整的二倍体,具有供体动物完整的基因。采用显微手术方法取出。 ;;克隆羊“多莉”的产生(1996,07,05);细胞核移植技术的类型 胚胎细胞核移植 根据细胞核移植对象 体细胞核移植 ;DOLLY的产生的重大意义 体细胞核移植成功 在理论上证明了,同植物细胞一样,分化了的动物细胞核也具有全能性,在分化过程中细胞核中的遗传物质没有不可逆变化; 在实践上证明了,利用体细胞进行动物克隆的技术是可行的,将有无数相同的细胞可用来作为供体进行核移植,并且在与卵细胞相融合前可对这些供体细胞进行一系列复杂的遗传操作,从而为大规模复制动物优良品种和生产转基因动物以及人类治疗性克隆提供了有效方法 ;四、核移植技术的应用前景与存在的问题;(二)存在的问题 成功率低,费用高(用于制作Dolly的费用已超过200万英磅 ) 克隆技术在理论和技术上都还很不成熟 克隆动物是否会记住供体细胞的年龄,克隆动物的连续后代是否会累积突变基因 生出的部分个体表现出生理或免疫缺;学习目的与要求

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