第一章色谱资料.pptVIP

下篇: 色谱制备技术;第一章 色谱分离技术概论;色谱法的基本原理 是利用混合物中的各组分在不相混溶的两相中行为不同，如分配系数（溶解性能），吸附解吸附能力的不同，或其它亲和作用性能的差异，使含混合物的气体或溶液流经该物质时，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。其中一相为流动相，即流动的含混合物的气体或溶液；一相为固定相，即固定的物质 (可以是固体或固定液)。 ;一、色谱法分类 ;2．按操作形式分类: 可分为平面色谱法、柱色谱法、电泳法及逆流分配等类别。 (1) 平面色谱法（plane chromatography）固定相被涂布于平面载板上进行的色谱法。分为: 纸色谱法（paper chromatography）：用滤纸作固定液的载体。 薄层色谱法(Thin layer chromatography，TLC) 将固定相涂铺在玻璃板或铝箔板等上 薄膜色谱法 (thin film column chromatography) 将高分子固定相??成薄膜。 薄层电泳法 用纸,纤维素,凝胶为支持物作成薄膜or薄层的电泳法等 ;(2) 柱色谱法（column chromatography）将固定相装于柱管内构成色谱柱，色谱过程在色谱柱内进行。 按色谱柱的粗细等差别，又可分为 填充柱（packed column）色谱法、 毛细管柱（capillary column）色谱法、 微填充柱色谱、 气相色谱法（GC）、 高效液相色谱法（high performance liquid chromatography；HPLC） 超临界流体色谱法等 ——属于柱色谱范围。 ;(3) 逆流分配法 （countercurrent distribution） 是将两个互不相溶的液态流动相与固定相放入多个分液漏斗中，样品中的各组分，在相对逆相流动的流动相与固定相中分配，按分配系数的差别分离。逆流分配属于液相色谱，是一种老方法，虽然也有自动化仪器，但已较少应用。 ; 3．按色谱过程的分离机制分类 可将色谱法分为： —吸附色谱法（absorption chromatography）、 —分配色谱法（partition chromatography）、 —空间排阻色谱法（steric exclusion chromatography；SEC）、 —离子交换色谱法（ion exchange chromatographv；IEC） —亲和色谱法（affinity chromatography）等 ;综上所述，简化分类如下表 ;二、色谱法的基本原理;—吸附—解吸附平衡过程 在层析过程中，流动相或展开剂是不断供给的，所以处于原点上的溶质不断地被解吸。解吸出来的溶质随着流动相或展开剂向前移动，遇到新的吸附剂，溶质和流动相或展开剂又会部分被吸附而建立暂时的平衡，这一暂时平衡立即又被不断移动的流动相或展开剂所破坏，使部分溶质解吸并随移动相向前移动，形成了吸附—解吸附的交替过程。所以层析的过程就是不断产生平衡，又不断破坏平衡的过程。溶质在经历了无数次这样的过程后移动到一定的高度。 ;—不同溶质对吸附剂有不同的亲和力．因而造成其随展开剂上升移动快慢不一。这一差异的根源主要是由化学结构的差异所引起的 —在含氧吸附剂上，例如硅胶和氧化铝，吸附物与吸附剂之间的作用力包括静电力、诱导力、色散力和氢键作用力，前三者为范德华力。 —被分离物质的极性越大，与极性吸附剂的作用就越强； 非极性被分离物与极性吸附剂相互作用时，使非极性分离物分子产生诱导偶极矩而吸附于吸附剂表面，称之为诱导力。 —氢键作用力是特殊的范德华引力，具有方向性和饱和性。 —这些类型的作用力的大小按下列顺序排列： 成盐作用力 ＞ 配位作用力 ＞ 氢键作用力 ＞ 偶极－偶极作用力 ＞ 诱导力 ;总之：吸附色谱的原理是： 由于混合物中的各个组分对吸附剂(固定相)的吸附能力不同，当流动相或展开剂流经吸附剂时，发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前移动，吸附力强的组分滞留在后，由于各组分具有不同的移动速率，最终得以在固定相薄层上分离。 ;（二） 分配色谱原理 ;(三)、空间排阻色谱法原理 因固定相是多孔性填料称为凝胶，故又称为凝胶色谱法 ；也称为分子排阻色谱法 。 —凝胶渗透色谱法(Gel permeation chromatography; GPC)以有机溶剂为流动相者称； —凝胶过滤色谱(Gel filtration chromatography ; GFC ) 以水溶液为流动相者 ;凝胶色谱法的分离机制 与前两种色谱法完全不同 它只取决于凝较的孔径的大小和被分离组分粒子的大小之间的关系，类似于分子筛的作用。 在一定分子粒