双波长薄层扫描法测定老君丹胶囊中黄芪甲苷含量.docVIP

双波长薄层扫描法测定老君丹胶囊中黄芪甲苷含量 作者：王淑琴 作者单位：吉林省中医药科学院,吉林 长春 130021 【关键词】 老君丹胶囊 黄芪甲苷 分离和提纯 色谱法 薄层 老君丹胶囊是由黄芪、刺五加、何首乌、女贞子、酸枣仁等中药制成的中药复方制剂，有较好的提高自身免疫力和升白效果。其中黄芪是临床治疗中使用频率最高的中药之一［1］,笔者选择黄芪甲苷为含量测定指标，采用双波长薄层扫描法进行含量测定，操作简便、准确、重现性较好，可有效控制制剂内在质量。 1 实验材料 CS-9301双波长薄层扫描仪（日本岛津），硅胶G（青岛海洋化工厂，薄层层析规格）,黄芪甲苷对照品（中国药品检定所，含量测定用），所用试剂均为分析纯。 2 实验方法与结果 2.1 薄层层析条件 薄层板为自制含0.3%CMC-Na硅胶G板（0.5 mm），展开剂为氯仿-甲醇-水（65：35：10）10℃以下放置的下层液，显色剂为10%的硫酸乙醇液。 2.2 薄层扫描条件 采用双波长反射锯齿扫描，检测波长λS=530 nm，参比波长λR=700 nm，线性参数Sx=3，狭缝0.4 mm×5.0 mm。 2.3 对照品溶液的制备 精密称取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇溶解并定溶于10 mL的量瓶中， 制成每1 mL含1 mg的对照品溶液。 2.4 供试品溶液的制备 取本品内溶物1 g，精密称定，加1%NaOH溶液20 mL溶解，用水饱和正丁醇振摇提取3次（30 mL，30 mL，30 mL），合并正丁醇提取液，蒸干，残渣加水5 mL溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1.5 cm，长12 cm）,以水50 mL洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30 mL洗脱，弃去40%乙醇洗脱液，继用70%乙醇80 mL洗脱，收集洗脱液，蒸干,残渣用甲醇溶解并转移至2 mL量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。 2.5 标准曲线的制备 取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1 mL含1 mg的对照品溶液，分别精密吸取1 μL、2 μL、3 μL、4 μL、5 μL，点于同一硅胶G薄层板上，按上述薄层条件展开,取出，晾干, 显色，封板，照薄层色谱法（中国药典2000年版1部附录）进行试验，测定峰面积积分值，根据峰面积积分值及给定的浓度，绘出峰面积─浓度的关系曲线，得回归方程：Y=482.23X-28.661（r=0.997），结果表明黄芪甲苷在浓度1 μg-5 μg之间，呈良好的线性关系。因标准曲线不通过原点，故应采用两点法测定。 2.6 稳定性试验 精密吸取供试品溶液4 μL，点于硅胶G薄层板上，依法展开，扫描，每隔30 min测定1次，取2 h内测定结果，RSD=2.3%，表明黄芪甲苷斑点在2 h内稳定。 2.7 精密度试验 2.7.1 同板精密度试验 精密吸取供试品溶液，在同一硅胶G薄层板上分别等量（4 μL）点5个样，依法展开、扫描，测定峰面积积分值，结果RSD=1.9%。 2.7.2 异板精密度试验 精密吸取供试品溶液4 μL，对照品溶液2 μL、4 μL，依法在5块不同的硅胶G薄层板上展开，扫描，测定，结果RSD=2.9%。 2.8 重现性试验 取同一批号样品，平行测定6次，结果RSD=3.1%，表明本方法具有较好的重现性。 2.9 回收率试验 取已知含量的样品5份，每份0.5 g，精密称定。 每份样品中精密加入黄芪甲苷对照品0.5 mg,依法操作,分别测定黄芪甲苷含量，并计算回收率，结果见表1。 表1 加样回收试验结果 3 小结 　 据文献报道,黄芪甲苷含量测定方法主要有薄层扫描法［2］、高效液相色谱法［3］等,目前多采用薄层扫描法。本实验采用1%NaOH溶解样品后，再用水饱和正丁醇提取，可省去氨试液处理步骤，有效去除样品中酸性成分，操作简便，干扰较小。并且试验结果表明，采用双波长薄层扫描法进行黄芪甲苷含量测定，操作简便、准确、重现性较好，可有效控制制剂内在质量。 【参考文献】 ［1］杨小飞,刘新瑞,孙剑波,等.黄芪的临床应用举隅［J］.吉林中医药,2004,24:（11）60-61. ［2］韩建伟,卢喜珍,熊 丽,等.薄层扫描法测定通脉活络丸中黄芪甲苷的含量［J］.中国医院药学杂志,1999,19（3）:158-159. ［3］田南卉,杨国红,方 颖,等.高效液相色谱法蒸发散射检测器测定黄芪和制剂中黄芪甲苷的含量［J］.药物分析杂志,2000,20（3）:199-200. 申明：本论文版权归原刊发杂志社所有，我们转载的目的是用于 学术交流与讨论，仅供参考不构成任何学术建议