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第三章基因工程制药4节
上次内容回顾（1）;上周内容回顾（2）;第四节 基因表达;;一、宿主细胞的选择（1）;一、宿主细胞的选择（2）;一、宿主细胞的选择（3）;⒈ 原核细胞;大肠杆菌用于基因表达的特点;;;⑵ 枯草芽胞杆菌;;⒉ 真核细胞;;;;二、大肠杆菌中的基因表达;;;;;;;; 细菌质粒的生物学特性
质粒（Plasmid）的定义：
质粒是存在于细菌等微生物细胞染色质以外的共价闭环的双股DNA分子，具有独立自主复制和调控能力，可赋予宿主细胞一定的生物性状。;; 质粒
（Plasmid）
是存在于细菌染色体外的小型环状双链DNA分子,大小约为数千碱基对。常有1 ~ 3个抗药性基因，以利于筛选。;;;基因工程制药所用的表达载体 必须具备的条件（1）;表达载体必须具备的条件（2）;表达载体必须具备的条件（3）;;;;;;;融合表达质粒pBG-2的结构;⒉ 影响目的基因 在大肠杆菌中表达的因素;细胞产量;;;①启动子的强弱;②核糖体结合位点的有效性;④密码子组成;;;;;;⒊ 真核基因在大肠杆菌中 的表达形式;;;;;三、酵母中的基因表达;;;;;;;;;α-因子分泌型表达载体 H： Hind Ⅲ位点 B: BamHI 位点 T: 酵母主要蛋白酶加工位点;⒉ 影响目的基因在酵母菌中 表达的因素;;;⑵ 外源基因的表达效率
① 启动子
必须将外源基因克隆到酵母菌表达载体的启动子和终止子之间，构成“表达框架”。近端启动子含有一个转录所必需的TATA序列和mRNA起始转录位点——起始密码子。终止子区含有终止mRNA转录所需的信号。 ;;常用的酵母启动子;;;;;;四、动物细胞中的基因表达;;;第三章 基因工程制药思考题（2）
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