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科研故事 HUMSCs向男性生殖细胞方向分化的研究 Differentiation of male germ cells from human umbilical cord mesenchymal stem cells （stem cell differentiation and transplantation ） ;2016/2/28;2016/2/28;2016/2/28;2016/2/28;2016/2/28;2016/2/28;2016/2/28;2015/7/2;1）取得成果：
生物学特性： Human umbilical cord Wharton’s Jelly-derived mesenchymal stem cells differentiation into nerve-like cells.Chinese Medical Journal. 2005;118 (23):1987
首次证实HUMSCs能向生殖细胞方向分化： Differentiation of human umbilical cord Wharton‘s jelly-derived mesenchymal stem cells into germ-like cells in vitro. J Cell Biochem, 2010. 109(4): 747
2）存在问题：
实验未能获得成熟的有功能的男性生殖细胞。
3）解决方案：
睾丸支持细胞对于男性生殖细胞的发生、成熟有着至关重要的作用。故我们的设想：体外分离培养睾丸支持细胞作为饲养层，模拟男性睾丸微环境诱导。（广东省课题3个）;2016/2/28;2）鉴定结果：诱导后， RT-PCR、免疫荧光、western-blot均显示其表达早期生殖细胞标记：stella、VASA、DAZL。 ;1）取得成果：
HUMSCs在模拟精原细胞的培养条件下，能表达男性生殖细胞早期的重要标记 Sertoli cell-mediated differentiation of male germ cell-like cells from human umbilical cord Wharton inverted question marks jelly-derived mesenchymal stem cells in an in vitro co-culture system. Eur J Med Res, 2015. 20(1): p. 9.
2）存在问题：
实验未能获得成熟的有功能的男性生殖细胞，细胞分化至减数分裂前期的生殖细胞时会发生“分化停滞”。
3）解决方案：
DAZL基因是生殖细胞发育过程中表达时间最长的基因，只有其存在于减数分裂的前后，可能参与了减数分裂；我们拟将 DAZL 基因转入 HUMSCs，观察 HUMSCs 分化为成熟男性生殖细胞的潜能。（国家自然科学基金课题1）
;方法：
通过腺病毒载体系统将DAZL导入HUMSCs中。
结果：
1）形态学改变：成纤维细胞样贴壁生长的HUMSCs （A），感染后部分存活细胞变成圆形（D），随着培养时间延长，出现蝌蚪样细胞，有类似精子的头、颈、 尾结构（E、F）。
;2）鉴定结果：RT-PCR和免疫荧光均表明：感染后HUMSCs表达精原干细胞相关标记OCT4、CKIT、 VASA、STELLA，但均不表达减数分裂阶段的标志SCP3、ACR。
;2016/2/28;2016/2/28;2016/2/28;2015/7/2;细胞在体内迁移过程：移植后1个月内，细胞主要存在于睾丸曲细精管的管腔内 (A)；移植后2个月，移植的huMSCs定居在基底膜(B)；移植后4个月，细胞又移行到管腔(C)。 ;2016/2/28;2015/7/2;2016/2/28;2016/2/28;HUMSCs对小鼠睾丸的修复功能;2016/2/28;
1）取得成果：HUMSCs能定植在小鼠的曲细精管中分化为精原样细胞，表达生殖细胞早期的重要标记，并能修复受损的曲细精管； Differentiation of human umbilical cord mesenchymal stem cells into germ?like cells in mouse seminiferous tubules. MOLECULAR MEDICINE REPORTS 2015 （12）: 819-828
2）存在问题：但仍然停滞在减数分裂前期；
3）解决方案：研究证实hESCs能在合适的分化体系中发育成男性生殖细胞，部分研究甚至获得单倍体细胞；iPSC具有与hESC相似的分化潜能。我们拟用BMP4诱导HUMSC源iPSCs向生殖细胞方向分化，观其启动减
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