4第四章炮制对毒、副作用影响的课程.ppt

蒋孟良 2010.5;中药经炮制后可降低毒性或副作用，使临床使用更为安全，如砂炒马钱子、米炒斑蝥、复制白附子等均可降低毒性；醋炙乳香可降低刺激性；制首乌、炒决明子、柏子仁制霜等均可减少副作用。根据药物的炮制目的和毒、副作用特点的不同，常进行LD50、最大耐受量、刺激性试验，长期毒性实验，应探讨药物炮制前后对生理生化指标（心电图、脑电图、血压、血常规、血液生化等）以及对主要脏器病理组织学的影响。以比较该药炮制前后毒性差异，并寻找最佳炮所方法，使该药毒性降低更多，安全性最可靠。但是必须注意，在降低毒性的同时，必须保存药效，故最好在进行炮制前后毒副作用的同时，进行主要药效研究。;第一节 炮制对药物毒性影响的研究;【实验方法】 2.1 预试（全部致死与全部不死剂量范围探索） 一般3只一组，组距应大点，一般为前一组剂量的1.2～2倍。 生附子使3只小鼠全部死亡的剂量是2.5g生药/kg，全部不死的剂量是0.82g生药/kg；熟附子使3只小鼠全部死亡的剂量是25g生药/kg，全部不死的剂量是8.4g生药/kg。;2.2 正式试验 取18～22g♂♀各半的小鼠100只，按体重和性别随机分为生附子和熟附子组。各个药物再分为5个剂量组，按低比稀释法(1:0.8)配制5种浓度药液，每剂量组10只动物。以预试全部动物死亡的剂量为最大剂量组，按1:0.8等比安排5组，ip给药。药液容量为0.2ml/10g。给药后各组小鼠于笼内，观察7天，以各药物组不同剂量小鼠死亡数和死亡率按孙氏综合法或改良寇氏法计算LD50。;【实验结果】 附子炮制前后对小鼠LD50的影响;药物; 3－Pm－Pn LD50=lg-1[Xm－i(∑P － 4 )] (孙氏综合法) LD50=lg-1[Xm－i(∑P－0.5)] (改良寇氏法) i=0.0969(相邻两剂量对数之差)；Xm=最大剂量对数；Pm=最大死亡率；Pn=最小死亡率。 lg LD50的标准误Sx50=i√ ∑P－∑ P2 / n－1 LD50的95%可信限=lg-1 (Sx50±1.96 Sx50) LD50平均可信限= LD50± 4.5 Sx50 LD50;生附子： LD50=lg－1[0.3979 - 0.0969（2.9-0.5）] = lg－1[0.3979-0.0969×2.4] = lg－10.1944 LD50= 1.564（g/kg） lg LD50的标准误Sx50=i√（ ∑P－∑P2 ）/（ n－1） = 0.0969√（ 2.6－1.78 ）/ （10－1） = 0.0969×0.3018 = 0.0293 LD50平均可信限= LD50± 4.5 Sx50 LD50 = 1.564± 4.5×0.0293×1.564 = 1.564±0.206（g/kg）= 1.358~1.770（g/kg） ;熟附子LD50平均可信限=15.22±1.966 = 13.254~17.186（g/kg） 【评 价】 用来评价药物炮制前后毒性的大小是常用的研究方法。本实验设计较为合理，但也可探讨不同炮制时间和不同辅料炮制药物对LD50的影响，以得最佳炮制工艺，但工作量大，耗费经费多。;第二节 炮制对药物刺激性影响的研究;1．2 炮制品 (1)样品1(生品)[l]：按《中华人民共和国药典》天南星项下炮制。 (2)样品2(药典法制品[1]：按《中华人民共和国药典》天南星项下炮制。 (3)样品3(胆南星)[2]：取药典法制品粉末(60目～80目)，l00kg天南星加入胆汁膏37.5kg(用水加热熔化)，混合拌均，做成块状，然后将其置笼屉内，蒸20～30min。取出，晒干。 (4)样品4(矾浸制品)：东北南星生品用白矾水漂8日，取出，晾后切片，干燥(100kg东北南星用白矾12.5kg)。 ;(5)样品5(矾煮制品)：东北南星生品用清水漂8日，再用白矾共浸1h后，煮2～3h，至内无干心。取出，晾后切片，干燥(100kg东北南星用白矾12.5kg)。 (6)样品6(姜煮制品)：东北南星生品用清水漂8日，再用生姜片的溶液(先把生姜片加入水中煮沸，冷却后即成姜液)共浸1时后，煮2时～3时，至内无干心。取出，晾后切片，干燥(100kg东北南星用生姜12.5kg)。 1．3 动物 昆明种小鼠，体重18g～22g，雌雄兼用；青紫蓝家兔，体重2.5～3.0kg，雌雄兼用。均由中国药科大学动物中心提供。 ;【实验方法】 2．1 口尝麻辣味实验[3] 2．1．1 样品的制备 从6份天南星炮制样品中各取形状、大小、厚薄都相近