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本课程内容;第五章 目的基因导入和重组子的筛选;5.1 DNA片段的连接重组;DNA分子连接;5.1.1 DNA重组（连接）的类型;5.1.2 DNA片段之间连接的方式;5.1.3 DNA重组中需注意的问题;5.2 受体细胞及其选择的基本原则;5.2.1 受体细胞;5.2.2 受体细胞选择的原则;5.3 基因转移（gene transfer）;;5.3 基因转移（gene transfer）;5.3.1 重组质粒DNA分子转化大肠杆菌;5.3.1.1 细菌转化的机制;;;5.3.1.2 化学转化法（CaCl2诱导大肠杆菌转化法）;5.3.1.2 化学转化法（CaCl2诱导大肠杆菌转化法）;5.3.1.3 电激法（电穿孔转化法）;5.3.1.4 转化率的计算及其影响因素;影响转化效率的因素;5.3.2 重组?噬菌体DNA分子转导大肠杆菌;;噬菌体转化大肠杆菌的方法;噬菌体转化大肠杆菌的方法;λ噬菌体的体外装配;λ噬菌体体外装配的两种系统;噬菌斑;重组噬菌体的鉴定;;利用lacZ基因的插入失活筛选重组噬菌斑 ;5.3.3 重组DNA分子转入真核细胞;5.4 重组子筛选的方法;5.4.1 遗传表型直接检测法;;抗药性选择标记插入失活/插入表达筛选法;根据载体的选择标记的初步筛选;;利用tetR的插入失活筛选重组克隆;抗药性选择标记插入表达筛选法;?-半乳糖苷酶显色反应筛选法（?－互补筛选）;;利用lacZ基因的插入失活筛选重组子;植物转基因载体的选择标记/报告基因;动物转基因载体的选择标记基因;5.4.2 依赖重组子结构特征分析的筛选法;5.4.2.1 琼脂糖凝胶电泳检测;5.4.2.2 限制性内切酶酶切分析检测;5.4.2.3 PCR法检测;5.4.2.4 核酸分子杂交检测法;菌落/噬菌斑原位杂交特点;5.4.3 基因表达产物分析法;5.4.4 DNA序列测定法;复习思考题
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