05生物制品的佐剂保护剂灭活剂.ppt.pptVIP

免疫佐剂、保护剂和灭活剂;免疫佐剂 ;佐 剂概述;对佐剂的基本要求 ;必须具有以下条件;佐剂的分类;(2) 非微生物物质 ;根据佐剂在体内存留时间分类 ;类型;佐剂的作用机理 ;2．对机体的作用 ;B细胞的作用 某些佐剂可以直接作用于B细胞，如细菌脂多糖，以B细胞为主要靶细胞，使之多克隆增殖，并诱导B细胞对T细胞的敏感性，从而增强对TD抗原的免疫应答，提高抗体水平。;不溶性盐类胶体佐剂 ;氢氧化铝胶 ; （二）常用佐剂的种类和制备;磷酸三钙 ;油乳佐剂 ;弗氏佐剂是疫学上广泛应用的油类佐剂，由低引力和低粘度的矿物油及乳化剂组成的一种贮藏性佐剂。 有两种类型，弗氏不完全佐剂、弗氏完全佐剂。佛氏完全佐剂是在不完全佐剂的基础上加一定量的分枝杆菌而成。 ; 在FIA中加入杀死的分枝杆菌或者卡介苗，即为弗氏完全佐剂(FCA)。每毫升FIA中，加入死分枝杆菌或卡介苗2-3mg，使用时与抗原等量混合。 FCA是一种强有力的佐剂，其作用机制是：特异性地刺激T细胞的功能，增强机体对胸腺依赖性抗原的应答；它还能刺激巨噬细胞的活性，促进吞噬作用和细胞毒作用。 FCA的缺点是：①它的油能通过肌膜层造成组织损伤，局部形成结形和无菌性脓肿；②FCA含有分枝杆菌，使结核菌素试验呈阳性反应；③粘稠，不便使用。;作用大于不完全佐剂 局部形成肉芽种和溃疡 不能用于人体;(二) 白油Span佐剂 ; 内容提要;灭活的概念 ;常用的灭活剂 ;甲醛的灭活作用是甲醛的醛基作用于微生物蛋白质的氨基产生羟甲基胺，作用于羧基形成亚甲基二醇单酯，作用于羟基生成羟甲基酚，作用于巯基生成硫代亚甲基二醇。 甲醛还可与RNA碱基中的游离氨基特异性结合，且结合的活性远远大于与DNA结合；可抑制微生物的蛋白质合成。 甲醛还可引起细菌蛋白中氨基与羟基发生分子内交联。 所有这些交联使微生物结构有轻微改变，失去活性，但不明显影响其免疫原性。 ;甲醛的使用浓度;(二) 苯酚;（三）结晶紫 ;(四) 烷化剂 ;影响灭活作用的因素 ;(三) 灭活剂浓度 ;(五) pH ;表3-1 常用灭活剂及灭活方法举例 ;冻干保护剂;冻干保护剂 （protector）;1．高分子物质 主要起骨架作用，防止低分子物质的碳化和氧化； 保护活性物质不受加热的影响； 使冻干制品形成多孔性、疏松的海绵状物，从而使溶解度增加。 高分子物质范围很广，种类甚多。诸如白蛋白、血清、明胶、脱脂乳、液体培养基、淀粉、酵母浸膏以及聚乙烯吡咯烷酮等合成聚合物。 ;2．低分子物质 低分子物质包括糖类和氨基酸类，前者如葡萄糖、乳糖、蔗糖、棉于糖等，后者如谷氨酸、天门冬氨酸、精氨酸、赖氨酸等。 低分子物质可产生均匀的混悬液，使微生物保持稳定的活存状态及对水分子起缓解作用； 能使冻干生物制品仍含有一定量水分； 还可促进高分子物质形成骨架，使冻干制品呈多孔的海绵状，从而增加溶解度。 ;3．抗氧化剂 抗氧化剂包括一些有机的和无机的物质，诸如抗坏血酸钠、硫脲、碘化钾、钼酸铵等。 抗氧化剂具有抑制冻干制品中的酶作用，从而保持微生物等活性物质的稳定性。 ;二、影响冻干保护剂效能的因素 ;4．保护剂pH 保护剂的pH应与微生物生存时的pH相同或相近，过高或过低都能导致微生物的死亡。 例如明胶蔗精保护剂的pH以6.8-7.0为最佳，否则会造成微生物大量死亡。 又如含葡萄糖、乳糖保护剂经高压灭菌后能改变保护剂的pH值，从而???响保护效果，为此最好采取滤过除菌。 ;三、常用的冻干保护剂 ;厌氧细菌 含0.1%谷氨酸钠的10%乳糖、10%脱脂乳、7.5%葡萄糖血清等。 ;．几种生物制品常用的保护剂 ;（3）聚乙烯吡咯烷酮乳糖保护剂 成分 聚乙烯吡咯烷酮K30-35 1g 乳糖 10g 蒸馏水加至 100m1 制法 　A 混合溶解，120℃高压灭菌20min。 B 经无菌检验合格后用于配苗。 （4） SPGA保护剂 成分 蔗糖 76.62g 磷酸二氢钾 0.52g 磷酸氢二钾