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实验 一 花粉生活力的测定;一、实验目的
学习和掌握花粉生活力测定的方法
测定在不同温度保存下的花粉生活力的变化情况;二、实验原理
;形态鉴定:
花粉有无生活力在形态上有明显差异,即形态是否发育正常,其内部淀粉等内含物是否充实。发育不正常的花粉,内含物不充实而空秕,形状也不规则,大小参差不齐。而正常花粉内含物充实饱满,形状规则,大小整齐。因内部含有较多淀粉粒而遇1%I-IK溶液呈深紫色反应,遇水易吸涨而破裂。一般适用于不育系及远缘杂交后代花粉形态和育性的鉴定。;花粉发芽鉴定:配制一定浓度的蔗糖溶液等作培养基,在人工控制条件下进行花粉发芽试验,根据花粉发芽率的高低衡量花粉生活力。也可以在授粉数小时后直接观察柱头花粉萌发伸长情况。
染色鉴定:用不同的化学试剂如氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride、C12H15N4Cl,简称TTC或四唑)、联苯胺茶酚等快速鉴定花粉生活力。
;三、实验用品
1、材料
正在开花的植株花粉(大樱桃 美早)
2、器具
盖、载玻片 凹式载玻片 培养皿 滴管 镊子 吸水纸 恒温箱 天平 烧杯 玻棒 电炉 普通显微镜
3、药品
蒸馏水 硼酸 蔗糖 琼脂 六偏磷酸钠;四、内容与方法(花粉萌发);4、镜检
在显微镜下隔一定时间检查一次(花粉发芽快的经过几个小时即可观察到已经发芽,慢的需24小时以上),若发现花粉已发芽时,就随机地在显微镜下取5个视野,记录花粉粒总数和发芽数,算出平均值,将观察结果填入表内。
花粉发芽的标准,以花粉管伸长超出花粉直径为准。若花粉发芽率在5%以下,为极弱,不能采用。 (花粉发芽率=发芽花粉总数\花粉总数)培养过程要密切观察,不可使花粉管萌发的太长,否则难以计数。
;配置培养基( 100ml水+1g+琼脂+0.01g硼酸+ 5-20g糖 )
煮沸溶化
用玻棒分装与凹玻片中
播撒花粉
置于培养皿中20-25℃恒温培养数小时
保持湿度
在显微镜下镜检计数;不同时间萌发率图;同期花粉萌发率对比图;五 结果与数据分析 ; 六 结论;六 实验的不足之处;谢谢大家!
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