生物素、亲和素标记技术资料.pptVIP

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  • 2016-07-28 发布于湖北
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生物素、亲和素标记技术;一、生物素及其理化性质 1 概念 2 分子式 结构特点 溶解特性 等电点 其它特性 ;1 概念: 生物素(biotin)是动、植物体内广泛分布的一种小分子生长因子,又名辅酶R或维生素H。 分子式: C10H16O3N2S 分子量:244.31;结构特点: 咪唑酮环/四氢噻吩环 结合亲和素 侧链末端羧基结合蛋白质 溶解特性: 难溶于水,易溶于二甲基甲酰胺(DMF);等电点: PH=3.5 其它特性: 羧基需经活化修饰才能结合蛋白质 (羧基活化的生物素,称为活化生物素,也叫生物素衍生物);生物素衍生物的种类及特性: 1 生物素羟丁酰亚胺酯(BNHS): DMF 制备:生物素 + N-羟基琥珀酰亚胺 二环己基碳二亚胺 标记特点: BNHS中的羧基与蛋白质中的赖氨酸氨基 结合达到标记的目的 适用于:标记Ab、酶、中性或偏碱性Ag、DNA;长臂活化生物素(BCNHS): DMF +

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