第六章吸光光度法课程.pptVIP

第六章 吸光光度法;6.1 吸光光度法的基本原理;6.4 显色反应;6.7 吸光光度法应用简介;6.1 吸光光度法的基本原理;6.1.1 光的基本性质;2.光的波粒二象性;3.单色光、复合光、光的互补;6.1.2 物质对光的吸收; 光作用于物质时，物质吸收了可见光，而显示出特征的颜色，这一过程与物质的 性质及光的性质有关。; 如测量某种物质对不同波长单色光的吸收程度，以 波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，可得到一条曲 线，称为吸收曲线或吸收光谱 。;3.定性分析与定量分析的基础;6.1.3吸光光度法的特点;6.2分光光度法的基本原理;6.2.1光吸收的基本定律;1. 透光率 （透射比）Transmittance;2. 吸光度（A ）：表示物质对光的吸收程度，其值为透光度的负对数，即：;式中， ? 为摩尔吸光系数，其单位是 ;吸光度 与透光率;1．Lamber-Beer定律的适用条件（前提） 入射光为单色光 吸光质点的形式不变 溶液是稀溶液;3.吸光度的加合性;? =1.1 ?104;2.摩尔吸光系数ε的讨论 （1）吸收物质在一定波长和溶剂，温度条件下的特征常数 （2）不随浓度c和光程长度b的改变而改变。 （3）对同一种待测物质，不同的方法具有不同的 ? ，表明具有不同的灵敏度。 例：分光光度法测铜 铜试剂法测 Cu ? 426 = 1.28 ? 104 L·mol-1·cm-1 双硫腙法测 Cu ? 495 = 1.58 ? 105 L·mol-1·cm-1 ;（4）同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波长λmax处的摩尔吸光系数，常以εmax表示。εmax表明了该吸收物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。 （5） εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。 ε105：超高灵敏； ε=(6～10）×104 ：高灵敏； ε=(2～6）×104 ：中等灵敏； ε2×104：不灵敏。 ;3、桑德尔指数 S S 值表示： 截面积为1 cm2的液层，在一定波长或波段处测得的吸光度A为0.001时，所含待测物质质量，单位为 ?g ．cm-2。 Sandell 灵敏度与? 的关系:;6.3 吸光分析方法;6.3.1目视比色法; 用纯度较高的单色光照射被测溶液，测量 其对光的吸收情况，再根据朗伯-比耳定律计算 。准确度、灵敏度较目视比色法提高很多；其 所用仪器称为分光光度计。;（一）可见分光光度计结构;0.575;(二）单波长单光束分光光度计;（三）单波长双光束分光光度计;6.4 显色反应; 显色反应;6.4.1 显色剂的选择;酸度的影响;一般显色反应的适宜酸度是通过实验确定的。;二、显色剂的用量;三、显色时间 实际工作中，作 A ~ t 曲线，寻找适宜 反应时间。 四、温度 五、溶剂 六、干扰物质 干扰物质本身有颜色、与显色剂反应、与被测离子反应、以及本身的沉淀和水解反应等，均会干扰测定。 消除措施：控制酸度、掩蔽、萃取和其他物理分离法，也可选择适当的测定波长。;6.5 光度测量的条件选择;6.5.1 测量波长的选择;仪器测量误差;为了减少测量误差，控制溶液的吸光度 ;6.5.3 参比液的选择;参比溶液的选择一般遵循以下原则：;6.6 光度分析法的误差;6.6.1偏离朗伯—比耳定律的原因;（一）光学因素 ;讨论： 入射光的谱带宽度严重影响吸光系数和吸收光谱形状 ; ｜Δε｜很小时，则可近似认为是单色光。 为克服非单色光引起的偏离，首先应选择比较好 的单色器。此外还应将入射光波长选定在待测 物质的最大吸收波长且吸收曲线较平坦处。;2．杂散光的影响： 杂散光是指从单色器分出的光不在入射光谱带宽度 范围内，与所选波长相距较远 杂散光来源：仪器本身缺陷；光学元件污染造成 杂散光可使吸收光谱变形，吸光度变值;（二）化学因素; （三）工作曲线不过原点 存在系统误差：吸收池不完全一样；参比溶液选择不当等。 ;6.7 吸光光度法应用;6.7.1 微量组分的测定;6.7.2 示差光度法; 示差法测得的吸光度与Δc呈直线关系。 由标准曲线上查得相应的Δc值，则待测溶 液浓度cx： cx =cs + Δc ;示差法标尺扩展原理 普通法： cs的T=10%；cx的T=