DNA提取2011重点.ppt

讲课教师;组织DNA制备;主要内容;一、提取DNA总的原则：;二、样本来源(Specimen)：;血清、血浆、外周血有核细胞、痰液、体液、棉拭子采集的各种分泌物、组织（包括骨髓）和羊水等都是分子诊断的检验材料，其中全血、血浆（血清）标本占分子诊断的60%以上 ;DNA提取前样本采集、预处理和保存：;（二）血浆和血清(plasma and serum);血浆DNA又称为循环DNA，是一种无细胞状态的胞外DNA，主要是游离的单链、双链DNA或DNA-蛋白质的混合物 它在未来分子诊断的应用中具有广阔前景 血浆DNA成分的来源分为内源性和外源性两个部分，其中入侵的病毒、细菌等病原体释放入血液的核酸是外源性血浆DNA最重要的成分; 血浆DNA (plasma DNA);（三）体液;（四）分泌物;结核分枝杆菌的检测，可以用NaOH液化痰液去除粘液和蛋白质；非结核分枝杆菌的核酸，使用生理盐水后取上清液 痰液检测病原体核酸不适宜作定量分析，检测时尽可能提高痰液中细胞成分的回收率 ;三、DNA提取的基本步骤;各种组织细胞破碎方法;破裂细胞 、释放核酸;2、核酸的分离与纯化(isolation and purity)： 将含有核酸分子复杂复合物中，将核酸与其 他物质分离 非核酸的大分子污染物（蛋白质、多糖和脂 类分子）、非需要的核酸分子、试剂和溶液;3、核酸的浓缩