基础学习实验食管癌细胞系总蛋白的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离鉴定资料.pptVIP

食管癌细胞系及总蛋白提取 总蛋白的SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳分离分析鉴定 食管正常细胞与食管癌细胞的差异蛋白鉴定;食管癌是我国常见的恶性肿瘤 在消化道恶性肿瘤中仅次于胃癌 发生于食管粘膜上皮 绝大多数为鳞癌、小部分为腺癌;中国是食管癌死亡率最高的国家, 在六大食管癌高发区中 ,只有潮汕高发区地处中国南部和沿海地理位置,其中,又以南澳县最高,食管癌粗死亡率在 100/ 10万以上,其次为揭阳和饶平地区。与中国其它食管癌高发地区相比较,该地区在地理位置、气候条件、居民的生活习惯等方面均有明显不同。;食管癌细胞系及总蛋白提取;细胞系（cell line） 原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。 也指可长期连续传代的培养细胞。 肿瘤细胞系多由癌瘤建成，多呈类上皮型细胞，常已传几十代或百代以上，并具有不死性和异体接种致瘤性。 已在细胞遗传学、分子遗传学和生物医学等方面得到越来越广泛的应用.其已被用于基因定位、检测理化因素的毒性和细胞因子活性、生产单克隆抗体、制备组织工程化人工器官和转基因动物等方面,更是研究发育生物学、肿瘤发生学、肿瘤治疗等不可或缺的材料. ;;细胞系名称 特点 EC109 中国男性 食管鳞癌细胞 EC9706 中国男性 65岁 病理诊断为食管蕈伞型高分化鳞 癌细胞 TE3 日本男性 48岁 起源于高分化食管鳞癌 转移至右 胸壁细胞 KYSE150 日本女性 49岁 低分化食管鳞癌细胞 KYSE180 日本男性 53岁 高分化食管鳞癌细胞 KYSE510 日本男性 67岁 在顺铂药物治疗与放射治疗后 高 分化的食管鳞癌细胞 HeLa 美国女性 子宫颈癌细胞系 SHEEC 汕头大学医学院建立的食管癌细胞系;癌细胞生长特性 ⑴无限增殖 在适宜条件下，癌细胞能无限增殖，成为“不死”的永生细胞。正常细胞都具有一定的最高分裂次数，如人的细胞一生只能分裂50～60次。然而癌细胞却失去了最高分裂次数。如在1951年由一位黑人妇女（名叫Henrietta Lacks)的宫颈癌细胞分离建立的HeLa细胞系，至今仍在世界许多实验室中广泛传代使用。 ⑵接触抑制现象丧失 正常细胞生长相互接触后，其运动和分裂活动都要停顿下来。在体外培养条件下则表现为细胞贴壁生长汇合成单层后即停止生长。癌细胞则不同，其分裂和增殖并不因细胞相互接触而终止，在体外培养时细胞可堆累成立体细胞群，故癌细胞接触对癌细胞的增殖无抑制作用。 ⑶癌细胞间粘着性减弱 癌细胞与其同源正常组织相比，细胞间的粘着性降低，故癌细胞在体内容易分散和转移。癌细胞的纤连粘蛋白显著减少或缺失，钙粘蛋白合成发生障碍，从而破坏了细胞与基质之间和细胞与细胞之间的粘着，因此癌细胞具有易于侵润组织和转移的属性。;⑷易于被凝集素凝集 癌细胞凝集性增强是由于质膜结构发生深刻变化所致。糖蛋白在质膜中的运动性增强，因而凝集素更容易将其受体（糖蛋白）簇集，形成更多的横桥。质膜糖蛋白运动性增强还可能是由于与其相连的微丝受到破坏所致。 ⑸粘壁性下降 葡糖胺聚糖是构成细胞外基质的主要成分，可形成水合凝胶。癌细胞合成葡糖胺聚糖减少，导致细胞粘壁性能下降。 ⑹细胞骨架结构紊乱 癌细胞中微管变短，排列紊乱，微丝亦发生结构异常。肌动蛋白丝的量减少，引起质膜流动性增强，细胞属性发生改变。由于细胞骨架结构紊乱，导致细胞外形亦发生改变。例如培养中的正常成纤维细胞呈扁平梭形，但被鸟类肉瘤病毒（含src癌基因）转化后，则变成球形，表面出现小泡，此即由于细胞骨架成分紊乱所致。;食管癌细胞系 Ec109;食管癌细胞系 EC9706;食管癌细胞系 KYSE150;食管癌细胞系 KYSE180;准备凝胶电泳的样品，