仪器分析第2章色谱分析-1.pptVIP

Chromatography ;色谱导论;2.1 概述;2.1 概述 ;2.1.2 色谱分类 ; 色谱分类（续）;2.2 色谱基本理论;2.2.1 色谱分离过程(流出曲线和色谱峰) 下面以A、B两组分的混合物在色谱柱中的分离过程来描述不同组分在柱中的分离，其分离过程如图所示． ;色谱分离过程示意图 Link ;2.2.2 色谱常用术语 ;色谱流出曲线Link;保留时间tR，死时间TM 调整保留时间t’R： t’R=tR-tM 保留体积VR ，死体积VM ， 调整保留体积V’R 相对保留值γi/s： γi/s= t’Ri/ t’Rs = V’Ri/ V’Rs;分配系数——在一定温度、压力下，两相间达到平衡时，组分在固定相与流动相中的浓度比，称为分配系数(K)，也叫平衡常数． K=Cl/Cg 式中：cl——组分在固定相中的浓度(g·mL-1) cg——组分在流动相中的浓度(g·mL-1);容量因子——是在一定温度、压力下，两相间达到平衡时，组分在固定相与流动相中分配的重量比． 分配比又称容量比或分配比． K’=p/q 式中： K’——分配比, p——组分在固定相中的重量, q——组分在流动相中的重量;分配系数K与分配比k有如下关系：; 根据上述定义，可知： tM——表示组分在流动相中停留的 时间 tR——表示组分在两相中（即柱中） 停留的总时间 tR’ = tR －tM——表示组分在固定相 中停留的时间 tM/tR——表示组分在流动相中停留 的比例数 tR’/tR——表示组分在固定相中停留 的比例数; 若组分的总分子数为N，每个分子的重量M，则： ;　分离度又叫分辨率，它定义为相邻两组分色谱峰保留值之差与两组分色谱峰峰宽平均值的比值，即;　　　R值越大，表明相邻两组分分离越好．一般说，当R＜1时，两峰有部分重叠；当R＝1时，分离程度可达98％，认为两峰基本分离；当R=1.5时，分离程度可达99.7％．通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志． ;下图表示了不同分离度时色谱峰分离的程度．;小结; 1941年詹姆斯和马丁提出塔板理论，把色谱柱比作一个精馏塔．借用精馏塔中塔板的概念、理论来处理色谱过程，并用理论塔板数作为衡量柱效率的指标。 塔板理论把组分在流动相和固定相间的分配行为看作在精馏塔中的分离过程，柱中有若干块想象的塔板，一个塔板的长度称为理论塔板高度。;在每一小块塔板内，一部分空间被固定相占据，另一部分空间充满流动相。 当组分随流动相进入色谱柱后，在每一块塔板内很快地在两相间达到一次分配平衡，经过若干个假想塔板的多次分配平衡后．分配系数小的组分先离开色谱柱，分配系数大的组分后离开色谱柱。 ;塔板数 塔板高度 ;有效塔板数;;1 从理论上得到了描述色谱流出曲线的方程，通过该方程可以预测具有不同分配系数K的两种物质在塔板数为n的色谱柱上分离的情况:;3 既然色谱分离的依据是组分在两相中的分配能力差异，因此，两相不限于液-固相，也可是气-固相或气-液相。;2.2.4 速率理论 ;1．涡流扩散项A;;2.分子扩散项B/u（纵向扩散项）;纵向分子扩散使峰变宽;3．传质阻力项Cu;对于填充柱，气相传质阻力系数Cg为;液相传质阻力系数Cl为;A+Cu ;思考： 1 怎样装柱才能提高色谱柱的效率？;u 在上述方程各项中存在矛盾， 因此，应求出最佳值：; 综合塔板理论和速率理论，可获得影响色谱分离效率的因素：;2.3 定性分析和定量分析;2.3.1 定性分析方法 1.纯物质对照法 保留值 ;改变色谱条件（分离柱、流动相、柱温等） 在样品中添加标准物质;2.文献值对照法： 保留指数 ;练习;3. 联用技术 气相色谱与质谱（GC－MS）、液相色谱与质谱（LC－MS）、气相色谱与红外（GC－FIR）、液相色谱与质谱与红外（LC－MS－FIR）等联用技术;2.3.2 定量分析方法 ;校正因子的求法： 绝对校正因子 相对校正因子 ;2. 定量分析 ;2）内标法： 原理:;特点： 由于标准物质和被测组分处在同一基体中，因此可以消除基体带来的干扰。而且当仪器参数和洗脱条件发生非人为的变化时，标准物质和样品组分都会受到同样影响，这样消除了系统误差。 方法准确 进样量影响不大