基因工程-1绪论.pptVIP

基因工程原理与技术;;多利和它的孩子 ;沃尔小组成功克隆两只恒河猴 ;吴明杰小组：5只克 隆猪;;生物技术，信息技术和新材料技术 生物技术： 传统生物技术 工业生物发酵技术 现代生物技术 现在人们常说的生物技术 实际上就是现代生物技术 ;现代生物技术;一、基因工程的概念 基因工程（genetic engineering） 利用DNA体外重组或PCR扩增技术从某种生物基因组中分离感兴趣的基因，或是用人工合成的方法获取基因，然后经过一系列切割，加工修饰，连接反应形成重组DNA分子，再将其转入适当的受体细胞，以期获得基因表达的过程。;基因工程(gene engineering)常和以下名称混用: 遗传工程(genetic engineering); 基因克隆(gene cloning); 分子克隆(molecular cloning); 基因操作(gene manipulation); 重组DNA技术(recombination DNA technique) 克隆(clone): 作名词时，指含有某目的DNA片段的重组DNA分子或含有该重组分子的无性繁殖系. 作动词时，是指基因的分离与重组过程。;;◆基因工程的对象是基因，所以如果是获得商品的话，就是基因的产品，或是改变了遗传性的细胞和个体。如果要获得效益的话，除了经济效益之外，还有巨大的社会效益。 ◆基因工程的对象是基因，而基因要安居才能乐业，也就是说基因需要在宿主细胞中工作，这样，基因工程同一般的土建工程的根本差别在于，它需要在体外操作，然后送到细胞中去进行表现。; 基因工程(gene engineering) 基因工程是以分子遗传学为理论基础， 以分子生物学和微生物学的现代方法为手段， 将不同来源的基因(DNA分子)， 按预先设计的蓝图， 在体外构建杂种DNA分子， 然后导入活细胞，以改变生物原有的遗传特性，获得新品种、生产新产品、或是研究基因的结构和功能。;; 2、载体DNA分离 载体DNA 感染或转染细胞（病毒型） 转化细菌细胞（质粒型） 分离病毒颗粒 培养转化细胞、收集菌体 病毒载体DNA分离与纯化 破碎细胞 质粒DNA分离与纯化;3、DNA片段的分离 DNA 限制酶切 凝胶电泳分离 特定DNA片段的回收 4、质量评估 1）?凝胶电泳 2）光密度值测定 3）限制酶切分析;在40年代确定了遗传信息的携带者，即基因的分子载体是DNA而不是蛋白质，从而明确了遗传的物质基础问题。 在50年代揭示了DNA分子的双螺旋模型和半保留复制机理，解决了基因的自我复制和传递的问题。 在50年代末期和60年代，相继提出了“中心法则”和操纵子学说，并成功的破译了遗传密码，从而阐明了信息的流向和表达问题。 ;体外操作与细胞内表达;中 心 法 则;基因是可以切割的 基因在染色体上的存在形式是直线排列。大多数基因彼此之间存在间隔，少数基因是重叠排列的。 ;基因是可以转移的 生物体内有的基因是可以在染色体上移动的，甚至可以在不同的染色体上跳跃，插入到靶DNA分子中。基因在转移的过程中就完成了基因间的重组。（转座子、反转座子） ;内容广泛、综合性的生物技术学科 在60年代科学发展的水平下真正实施基因工程，还存在许多问题，特别是在技术方面。;20世纪60年代末70年代初，限制性内切酶和DNA连接酶等的发现，使DNA分子进行体外切割和连接成为可能。 70年代中期，DNA分子的核苷酸序列分析技术问世。 这两项技术，使DNA的结构分析问题得到了根本的解决。 ;在60年代发展出了琼脂糖凝胶电泳和Southern转移杂交技术，这对于DNA片断的分离、检测十分有用，并很快被应用于基因操作实验。 1972年首次构建了一个重组DNA分子，并提出了体外重组的DNA分子进入宿主细胞的过程，以及在其中进行复制和有效表达等问题。 ; ?第一个重组体的构建 1972年，美国斯坦福大学P.Berg等在PNAS上发表了题为∶ “Bioche