D-核糖研究动态.docVIP

D-核糖发酵研究动态D–核糖（D-Ribose），化学名称为D-呋喃核糖。分子式为C5H10O5分子量150.13。D-核糖其理化性能为白色结晶粉末状，微有芳香之味，极易吸潮，能溶于水和甲醇，在水中有在过饱和倾向，以糖浆形式存在。微溶于乙醇，不溶于醚、苯、丙酮及氯仿。熔点：86-87，比旋度：-19.5—-25 （24水中）。　　D-核糖是五碳糖,以化合物的形式存在于一切细胞中。对生物体来说，葡萄糖是一种较好的碳源和能源，而D–核糖则是一种与生物遗传物质有关的非常重要的糖类，在生理上具有十分重要的作用。一九零九年，核糖首先被莱文（Leven）和雅各布斯（Jacbs）所鉴定。在其后的研究中发现，D-核糖是rnRNA、tRNA、sRNA、5sRNA等各种RNA的组成糖，也是各种核苷酸辅酶的组成糖。通常核糖与磷酸在体内一起运转。D-核糖既是体内核糖核酸、核苷酸辅酶类的构成成份，又是一种还原型诱导物，在各种核糖核酸中承担了重要生物活性功能的作用，在生物体内完成极其重要的任务。　　在自然界中，D-核糖不以单体形式存在，多年来一直作为昂贵的生物化学试剂被应用。用微生物发酵方法大规模地生产出的D-核糖，价格低廉。在医药上是大规模合成核黄素、病毒唑的主要原料，可大幅度经济有效的降低该药的生产成本。D–核糖嵌入某些物质分子结构中是治疗艾滋病，以及抗癌、抗病毒的有效药物。D-核糖本身可以作为药物，用于治疗心肌局部出血，提高心脏局部缺血的耐性和改善心脏功能，也可以用于治疗运动导致的肌肉疼痛，由于缺乏肌腺苷酸脱氢酶导致的强直僵硬以及因为细胞内缺乏磷酸化酶导致的肌肉疼痛疾病。在食品工业上，D-核糖可用于合成牛肉香精。1 D-核糖制取方法1.1抽提法　　D-核糖的制取方法最早是从天然物种抽提。 1955年从酵母核糖核酸等原料中制取成功。这一方法产率低、成本高。1.2化学合成法　　1920年发明了化学合成法制备D-核糖。在D-核糖有机合成法制取的工艺过程中，最早采用汞电极电解法进行合成。以后许多学者对化学合成法制取的工艺进行了多次改良，缩短了反应步骤。D-核糖化学合成法经改良后，以葡萄糖为原料，经氧化、置换、转化、再置换、酸化、内酯化、还原等七步反应获得。但是改良后的化学合成法仍然没有解决环境污染问题。目前D-核糖抽提法、化学合成法已被微生物发酵法所取代。1.3微生物发酵法1.3.1野生菌产生D-核糖　　关于利用微生物发酵D-核糖的最初报道是在1951年。比利时的西莫纳尔特（Simonart）和戈丁（Godin）用短密青霉（Penicillum brevicompactum）在培养液中观察到微量的D-核糖，他们用纸层析进行了定性研究，但是没有记载生成量。约十年以后，在日本氨基酸发酵生产、研究进入了极为鼎盛时期的六十年代里，协和发酵的玲木等人，发现一株未确定名称的细菌，在培养液内产生D-核糖，1963年作了报道。D-核糖的生产受培养基中存在的锰、铁、锌离子的影响。在最适条件下，生成5.2mg/ml D-核糖。培养基中用磷酸代替金属离子，发酵液内则不积累D-核糖而积累7.4mg/ml D-核糖-5-磷酸和磷酸核糖焦磷酸。1966年野田产研的斋藤和杉山用食爬虫假单胞菌（Pseudomonas reptilivova）进行培养，发酵液内生成0.72mg/ml D-核糖。这些早期利用微生物生产D-核糖的方法，都是使用野生菌株进行研究，产率均很低。1.3.2突变菌株产生D-核糖　　在发酵工业中，继L-谷氨酸发酵生产工业化以后，二十世纪五十年代末期开展了呈味核苷酸的研究工作。微生物菌种在嘌呤核苷代谢过程中，5’-磷酸-D-核糖是嘌呤核苷形成的前体物质。在对呈味核苷酸的研究过程中发现Bacillus属的细菌糖代谢发生突变后，可以大量的积累D-核糖。D-核糖发酵研究工作是在对呈味核苷酸研究中延伸出来的分支。国外在七十年代开始大量发表微生物发酵法生产D-核糖的文献。在微生物菌种方面有芽孢杆菌、棒状杆菌、短杆菌、节杆菌、假单孢杆菌以及酵母菌等等。在应用方面报道较多、产核糖能力较强的菌种是短小芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌。七十年代初期，日本的Sasajima等人在研究微生物菌种突变对嘌呤生物合成中碳水化物代谢的影响时，由一株芽孢杆菌分离出三株转酮醇酶变异株（Tramsketolase mutant）。这三株芽孢杆菌的亲株， 生长时需要腺嘌呤、黄嘌呤，对8-氮杂鸟嘌呤具有抗性，可以生产多量肌苷。它的二株变异株，生长时需要L-酪氨酸、L-色氨酸、L-苯丙氨酸，另外一株变异株不能利用D-葡萄糖酸盐。这些变异株培养于含有葡萄糖12.5%、碳酸钙1.0%、干酵母2.5%、硫酸铵1.5%、磷酸氢钙0.5%、磷酸钙0.5%，培养基PH控制在7.0左右，培养6天后D-核糖生成