MicroRNA在大鼠坐骨神经损伤修复中的有效性研究重点.pptxVIP

王建勇敖强韦玉军龚锴中国医科大学组织工程教研室清华大学医学中心2015年11月01日MicroRNA-338在大鼠坐骨神经损伤修复中的有效性研究自体移植神经修复导管分子生物治疗国外研究国内研究周围神经修复研究背景MicroRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子，它们在动植物中参与转录后。到目前为止，在动植物以及病毒中已经发现有28645miRNA分子。大多数miRNA基因以单拷贝、多拷贝或基因基因簇(cluster)的形式存在于基因组中miRNA对周围神经损伤修复研究背景目前，国内外学者研究miRNA对周围神经损伤修复影响的研究主要集中在两个方面：一是在细胞水平研究miRNA对雪旺细胞增殖、迁移髓鞘化和/或神经元轴突延长的影响；有研究表明，miRNA338能够促进雪旺细胞增殖及促进体外培养的DRG髓鞘化；二是研究坐骨神经损伤后脊髓、DRG、坐骨神经以及其支配的肌肉中相关miRNA表达的变化情况，对如何利miRNA治疗坐骨神经修复损伤以及体内评估miRNA促进坐骨神经损伤修复的治疗效果方面仍然是空白。实验方法实验方法行为学影像学电生理组织学透射电镜免疫荧光结果行为学观察A～D：术后8周空病毒对照组大鼠体征，术侧后肢握力不强，不能较好的伸展，行走时被动拖曳足背，并且有自残倾向（箭头所示）。F～I：术后8周mir-338实验组大鼠体征，术侧后肢握力较好，能够主动伸展伸直，并且奔跑中活动自如（箭头所示）。坐骨神经功能指数（SFI）SFI=-38.3(EPL-NPL)/NPL+109.5(ETS-NTS)/NTS+13.3(EITS-NITS)/NITS-80表示功能正常，-100表示坐骨神经功能完全丧失。核磁共振A～B:mir-21实验组壳聚糖导管桥接，能明显看到导管位置，神经通过导管生长良好。C～D:对照组导管下游没有看到明显的神经生长电生理大鼠术后2个月检测到的神经-肌肉动作电位（CMAPs）A:GFP空病毒对照组；Bmir-338慢病毒实验组：；C：正常神经组；D：坐骨神经传导速度BHE和乙酰胆碱酯酶染色A-C：8周后各组大鼠术侧腓肠肌HE染色，A对照组横纹肌走行不规则，细胞核排列紊乱；B实验组横纹肌较规则，细胞核分布均匀；C正常组横纹肌走行连续，排列规则；D-F：8周后各组大鼠术侧腓肠肌乙酰胆碱酯酶染色，D对照组乙酰胆碱酯酶减少，肌纤维较不规则；E实验组乙酰胆碱酯酶较多，肌纤维走行比较规则；F正常胆碱酯酶染色，数量较多，排列整齐；甲苯胺蓝染色术后第8周各组再生神经组织和正常神经组织半薄切片甲苯胺蓝染色。Bar=50umA：GFP空病毒对照组；B：mir-338慢病毒实验组；C：正常神经组织；D：坐骨神经轴突直径长度电镜……术后第8周各组再生神经组织和正常神经组织超薄切片透射电镜观察。A：GFP空病毒对照组；B：mir-338慢病毒实验组；C：正常组；D：各组髓鞘厚度百分比分布免疫组织化学染色术后8周各组再生神经远端组织和正常神经组织的免疫组化观察。a1-a3:正常神经b1-b3：mir-21慢病毒组；c1-c3：空病毒对照组；红色的为NF-200免疫组化染色，绿色的为S100免疫组化染色。标尺为10μmHowdothisfunction?Hes5Sox6PMP22S-100MBPP0Sox10Sox11观察预测appreciation感谢敖强教授韦玉军原晓晶季玉陈龚锴张明THANKS