实验五用大肠杆菌生长曲线的测定.pptVIP

大肠杆菌生长曲线的测定水、环境中微生物的测定;了解光电比浊计数法的原理。 学习、掌握光电比浊计数的操作方法。 通过细菌数量的测量了解大肠杆菌的生物特征和规律，绘制生长曲线。 ;生长曲线 将少量纯种单细胞微生物接种到定量的液体培养基中，定时取样测定细胞数量，以培养时间为横坐标，以菌数为纵坐标作图，得到一条反映单细胞微生物在整个培养期间菌数变化规律的曲线。;微生物数量的测定方法;稀释平板计数法;最大概率法;最大概率法;光电比浊法;菌种 培养不同时段的大肠杆菌。 仪器或其他用具 分光光度计，比色皿等。;开电源，仪器预热20 min，将波长调至600 nm处。 打开样品室，将挡光体插入比色皿架，将其推或拉入光路。 盖好样品室盖，在T MODE下，按0%T键调零透射比。 取出挡光体，按100%T/OA键调100%透射比。;2.样品测定; 在600 nm波长下，用未接种的LB液体培养基作空白对照，分别对培养了0、4、8、12、16和20 h的大肠杆菌培养液，进行光电比浊测定。对于高浓度的大肠杆菌培养液,要用未接种的LB培养基进行稀释，使其吸光值在0.1-0.65范围内。;四、实验结果;五、思考题;比较不同场所和不同条件下细菌的数量和类型。 观察不同类群微生物的菌落形态特征。 体会无菌操作的重要性。 掌握水和环境中微生物的测定方法。 检测污染水域微生物的类型和数量。 ;应用平板菌落计数技术测定污染水的细菌总数。由于细菌种类繁多，不可能找到一种培养基在一种条件下，使所有的细菌均能生长繁殖。因此，计算出来的细菌总数仅是一种近似值。 利用普通牛肉膏蛋白胨琼脂培养基可以大致测定不同环境中存在的微生物。;样品的采取 自来水 取自自来水管道。 橙汁 购于超市。 口腔、人民币、门把手和实验环境中的微生物。 南湖水 距水面10-15 cm的深层水样。 培养基 牛肉膏蛋白胨琼脂培养基 。 仪器或其他用具 灭菌培养皿，无菌枪头，涂棒等。; 无菌操作采用10-1， 10-2 ， 10-3稀释液涂布牛肉膏蛋白胨平板;每个稀释度2个重复。;(LTA);四、实验结果;五、思考题;本次实验安排;本次实验完