09第九章其它标记免疫技术课程.pptVIP

第九章其它标记免疫分析技术;返回总目录;第一节 放射免疫技术 （radioimmunoassay）;放射性核素是指原子核能自发产生成分或能级的变化，变成另一种核素，同时伴有射线发射的元素。 放射性核素根据其衰变方式分为α、β、γ三种，用于放射标记的有β（14C、3H）、γ（131I和125I）两种，分别用液体闪烁技术和γ计数器测定。 目前以125I应用最为广泛。;用于标记的抗原纯度要高，有完整的 免疫活性，抗体的亲和常数要高，抗体滴度高并且交叉反应率低。 ; 在RIA中，标记抗原质量的优劣，直接影响测定结果，必须制备比放射性强、纯度高的标记抗原，并保持免疫活性不受丧失。 常用的标记方法： ◇ 直接标记法 ◇ 间接标记法;（四）放射性核素标记物的纯化与鉴定;（2）标记物的鉴定;（3）抗体的选用;①抗体亲和性;②抗体特异性;③抗体的效价; 二、放射免疫分析;（一）放射免疫分析原理;Ab限量，Ag*定量, Ag*和Ag的量大于 Ab结合位点，二者 通过竞争方式与Ab 结合；随着Ag增加，Ag*与Ab结合形成Ag*Ab复合物的放 射量降低,二者变化 成函数关系。 ;（二）实验方法;★免疫复合物（B）与游离标记物（F）的分离;晶体闪烁计数器包括了NaI闪烁晶体、光电倍增管以及计数器 测量的放射性信 号是仪器输出的 电脉冲数：每分钟计数(cpm