第四章2-紫外-可见分光光度法研究.ppt

§4.2 Lambert-Beer 定律;;二、Lambert-Beer 定律 （一）Lambert定律 1760年 A= k’ l （二）Beer定律 1852年 A= k’’ c （三）Lambert-Beer 定律 A= k·c·l k --- 比例系数（与溶液的性质、温度及入射光波长 等因素有关） c --- 溶液的浓度 l --- 液层的厚度 ;（四）Lambert-Beer 定律 A= k·c·l ---- UV-Vis进行定量分析的依据 适用条件： a. 0.01 mol L-1稀溶液 b. 溶液中吸光质点间没有相互作用 （离解、缔合、互变异构、配位数变化） c. 非散射的均匀介质 d. 吸光度具有加和性（采用双波长法进行测量的原因） e. 单色光照射 ;（五）A= k·c·l中的k 1. 吸光系数a： 当c：g/L时，k→a A= a·c·l a: dm3·g-1·cm-1 (L·g-1·cm-1) 2. 摩尔吸光系数ε：当c：mol/L时，k → ε A= ε·c·l ε：dm3·mol-1·cm-1 (L·mol-1·cm-1) （1）物理意义：吸光物质的浓度为1 mol/L，液层厚度为1 cm时，溶液的吸光度 （2）定性分析：参考ε （3）定量分析： ε估量灵敏度 ;（4）ε与λ有关，表示某物质溶液的ε时，应注明λ值（ ε与溶液的性质、温度和入射光λ有关） （5）由较稀溶液的吸光度求得 （6）比吸光系数: 质量分数为1%，l为1cm时的吸光度值 ε= 0.1 M M---吸光物质的摩尔质量 ;（7）桑德尔（Sandell）灵敏度 a. 定义：当吸光度等于0.001时，单位截面积光程内所能检测出的吸光物质的最低含量。S： ?g / cm2 b. S与ε关系 A= ε·c·l = 0.001 → c·l= 0.001 / ε ;偏离Lambert-Beer定律的因素 （一）与测定样品溶液有关的因素 1. 溶液浓度 0.01 mol L-1稀溶液 2. 试样中各组分之间没有相互作用（离解、缔合、光化反应、互变异构、配合物配位数变化） 3. 溶剂（不同溶剂， ε不同） 4. 散射光 T↓ A↑（正偏差） （二）与仪器有关的因素 非单色光 ;§4.3 紫外-可见分光光度计;;（一）光源 可见区：热辐射光源 钨灯、卤钨灯 紫外区：气体放电光源 氢灯、氘灯 紫外-可见光区：高压氙灯 ;（二）单色器：色散元件 棱镜和光栅 （三）吸收池： 石英：用于紫外区或可见区 玻璃：用于可见区 （四）检测器：放大、记录指示 光电池：硒光电池 对光敏感范围300-800 nm， 500-600 nm最灵敏 蓝敏：210-625 nm 光电管 红敏：625-1000 nm 光电倍增管 （五）信号指示系统;二、紫外-可见分光光度计的类型 单光束分光光度计：如721，722，752，Beckman DU-8 双光束分光光度计：抵消光源强度变化所引起的误差，如：710，730，740 双波长分光光度计：适于多组分混合物