用紫外可见分光光度法测定苯甲酸.docVIP

用紫外可见分光光度法测定苯甲酸 目的与要求 1、掌握吸收曲线的测定与绘制方法 2、掌握直接比较法定量的方法 3、熟悉紫外分光光度计的使用方法 原理 样品中的苯甲酸在酸性条件下可用水蒸气蒸馏法提取，在碱性条件下形成苯甲酸盐。苯甲酸及其盐对紫外光有选择性吸收，其吸收光谱的最大吸收波长在225nm左右。 用紫外可见分光光度计可测定物质在紫外光区、可见光区的吸收光谱，并可定量测定。 仪器与试剂 1、仪器 751型分光光度计；1cm石英吸收池一套；50ml容量瓶二只；刻度吸管5ml、10ml各一只；滴管一只。 2、试剂 苯甲酸标准储备液（1ml相当于0.1mg苯甲酸）；0.1mol/L、0.01mol/L氢氧化钠溶液。 操作步骤 1、苯甲酸吸收曲线的绘制 取苯甲酸储备液4.00ml，置于50ml容量瓶中，用0.01mol/L氢氧化钠溶液定容，摇匀。此液1ml相当于8μg苯甲酸。 测定条件：氢灯，1cm石英比色皿，0.01mol/L氢氧化钠为参比 测定波长：从210nm-240nm每隔一定波长（2nm-5nm）测定一次吸光度，在225nm左右隔1nm测定一次吸光度制苯甲酸的紫外吸收曲线，得最大吸收波长为测定波长。 2、直接比较法测定样品溶液中苯甲酸的含量 取10.00ml样品溶液，置于50ml容量瓶中，用0.01mol/L氢氧化钠溶液定容，摇匀后备用。 以0.01mol/L氢氧化钠溶液为参比溶液，在完全相同的条件下测定苯甲酸标准溶液和稀释好的样品溶液的吸光度值。 3、结果处理 按下式计算样品溶液中苯甲酸的浓度： Cx μg/ml 8×50×Ax / 10As Cx:待测样品液的浓度；Ax是待测样品溶液的吸收值；As是苯甲酸标准液的吸收值。