病毒的增殖与培养.ppt.pptVIP

一、病毒的增殖：;病毒复制周期(virus replication circle): 可分为五个阶段;几分至几十分钟，分两个阶段 （1）非特异性吸附：可逆的静电吸附 （2）特异性吸附：病毒蛋白与细胞膜受体特异 结合;2.穿入（Penetration）;胞饮（viropexis）或吞饮（endocytosis） ： 即病毒与细胞表面结合后，细胞膜内陷形成类似吞噬泡，病毒原封不动的进入细胞质。部分包膜病毒及多数无包膜病毒以吞饮方式进入细胞。 直接穿入： 病毒直接穿过细胞过，完整的进入胞浆。;3.脱壳（Uncoating）;4.生物合成（Biosynthesis、隐蔽期）;6大类型: 双链DNA病毒 单链DNA病毒 单正链RNA病毒 单负链RNA病毒 双链RNA病毒 逆转录病毒 合成区域： DNA病毒：核内（除痘病毒） RNA病毒：胞质（除流感病毒及逆转录病毒） 所有蛋白：均在胞质合??;（1）双链DNA病毒：人和动物的DNA病毒基因组大多数为双链DNA，例如疱疹病毒、腺病毒。 核酸在胞浆中暴露后继续感染入细胞核 在细胞核内合成DNA 病毒蛋白在胞质内合成;只有痘病毒例外，因其本身携带DNA多 聚酶，DNA和蛋白质都在胞质内合成。 由于病毒基因进入细胞核内，它们可能与细胞染色体发生基因重组与整合，还有机会激活细胞的癌基因，引发更多的类型的细胞病变。;（2）单链DNA病毒：这类病毒种类很少 DNA先合成互补链形成复制中间体 中间复制体再解链，复制为两条双链DNA 含有亲代DNA链的双链DNA将复制子代DNA链 不含亲代链的双链DNA转录和翻译非结构蛋白及结构蛋白。;（3）RNA病毒：大多数感染人或动物的病毒为单链RNA病毒，除流感病毒及个别副粘病毒，绝大部分RNA病毒的生物合成并不需要DNA参与。所以子代病毒的复制在宿主细胞的胞浆区完成。 单链RNA病毒分为单正链RNA病毒与单负链RNA病毒。;单正链RNA病毒的RNA基因本身就有mRNA的功能，可直接附着于胞质的核糖体 在复制早期先转译出复制子代病毒所必须的非结构蛋白，即依赖RNA的RNA多聚酶等 然后辅助亲代RNA合成互补链，成为双链RNA，也被称为中间复制型 双链RNA再解链，完成子代核酸与结构蛋白（如衣壳等）的复制及转译。;单负链RNA病毒的核酸不具备mRNA的功能，因此病毒的核心结构直接携带有依赖RNA的RNA多聚酶等必须的非结构蛋白 因此亲代RNA首先合成互补链，成为双链RNA的中间复制型 然后再解链，开始子代病毒RNA的复制及各类蛋白的转译;因多数RNA病毒的合成不进入细胞核内，因此不会出现RNA病毒的整合（逆转录病毒例外） 由于宿主细胞不会合成依赖RNA的RNA多聚酶，因此这一酶可作为抗病毒作用的靶点 在生物合成中，RNA病毒形成的复制中间型可高效地大量复制，因此RNA病毒增殖一个周期所需时间少于DNA病毒。;（4）逆转录：逆转录病毒是RNA病毒，但其生物合成过程很独特 这类病毒含有两条单正链RNA，都是模板链 带有逆转录酶，可以亲代RNA为模板合成互补的DNA链，即逆转录。 逆转录得到的dsDNA能够进入细胞核，并同宿主基因整合;逆转录病毒进入胞浆以后，合成一条与RNA互补的DNA链，形成RNA:DNA的杂交体 然后亲代的RNA链降解，剩下单链DNA 以该DNA链为模板合成互补的另一条DNA链，成为双链DNA分子 双链DNA分子进入宿主细胞的细胞核内，整合入细胞的染色体DNA上，成为前病毒（provirus） 随宿主细胞的分裂而存在于子代细胞内 前病毒还可转录出子代病毒的RNA及病毒的mRNA 这类病毒是第一个被确定的人类肿瘤病毒。;5.装配、成熟和释放 （Assembly ，maturation and Release）;裂解（Disintegration）: 裸病毒及部分RNA病毒装配完成后，随宿主细胞破裂而释放。 出芽（Budding）: 包膜病毒及部分RNA以出芽方式释放，细胞通常不死亡。 ;HIV病毒以出芽方式离开细胞;噬菌体胀破细菌后以裂解方式离开菌体; （二）干扰现象（interference） 两种病毒感染同一细胞或机体时，发生一种病毒抑制另一种病毒复制的现象，称为干扰现象。 可发生于： 不同种类的病毒之间 同种不同型、不同株之间 其规律为: 先感染干扰后感染 灭活病毒干扰有活性病毒 缺陷病毒干扰完整病毒;（三）病毒的遗传与变异 病毒的变异包括基因突变和基因重组与重配。 基因突变（gene