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肝炎病毒及其检验; 肝炎病毒(hepatitis viruses,HV)是指以侵害肝脏为主引起病毒性肝炎的一组病原体。
目前公认的肝炎病毒至少有5种,即甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、丁型肝炎病毒(HDV)和戊型肝炎病毒(HEV)。
近年还发现一些与人类肝炎相关的病毒,如GB病毒-C/庚型肝炎病毒(GBV-C/HGV)和输血传播性病毒(TTV)病毒,但由于致病性不清,均未被最后确定和命名。
此外,还有一些病毒如黄热病毒、CMV、EBV、风疹病毒等虽也可引起肝炎,但不列入肝炎病毒范围之内。
;属于不同的科family和属genus;;第一节 甲型肝炎病毒 ;世界各地HAV流行状况
;;1、形态与结构 ;2、血清型;3、易感动物和细胞培养
动物模型 黑猩猩、狨猴及猕猴等灵长类动物易感,且可传代 。
细胞培养 HAV生长缓慢,接种后约需4周才可 检出抗原HAV可用非洲绿猴肾细胞、人胚肾细胞、传代猴肾细胞 (Vero、BSC-1、FRhK-4、FRhK-6)、人胚肺2倍体成纤维细胞和人肝癌细胞株 (PLC/PRF/5) 等。
;4、抵抗力
; 温 度 60℃ 可存活4h
80℃ 5min完全灭活
100℃ 1min完全灭活
4℃其抗原性和组织培养活性可保持1年
-20℃可存活多年并保持传染性 ;化学消毒剂 3%福尔马林5min均可灭活
70%乙醇3min部分灭活
不耐受冷冻干燥,对紫外线敏感;;1、传染源与传播途径
传染源:多为患者和隐性感染者。患者潜伏期后期及
急性期的血液和粪便均有传染性。
传播途径:主要通过粪-口途径传播
经食物传播
经食用受污染的贝壳类水产品
经产、供、销环节污染的食物
经水传播
卫生条件差的国家和地区
特点 发病者多饮用同一水源,病例分布与供水范围一致
日常生活接触传播 ;致病机制
HAV主要侵犯儿童和青年,且多为隐性感染:
HAV 口 小肠淋巴结内增殖 血(病毒血症)
肝细胞内增殖 致病(出现临床症状)。
;免疫性
感染后可产生持久免疫力。
早期:IgM;同时,从粪便中检出sIgA抗体。
恢复期:IgG,并可持续多年;
特异细胞免疫应答。
;
(一) 病毒检测:潜伏期末期和急性期早期,取粪便用免疫电镜检测HAV颗粒;用放射免疫 (RIA) 或酶免疫 (EIA) 法检测HAV 的抗原。
(二) 血清学检查:检测抗HAV常用RIA和EIA法。检测抗HAV IgM有助于早期诊断;测抗HAV IgG有助于流行病学调查;测粪便中抗HAV IgA也有助于诊断。
(三) 病毒核酸检测:应用 cDNA-RNA分子杂交技术及PCR技术检测HAV的RNA,方法特异、敏感。;
HAV感染后以隐性感染和无黄疽型病例占多数。
预防:一般性预防:搞好卫生。
特异性预防:我国使用减毒甲型肝炎活疫苗(H2
株和L1株);国外已生产灭活疫苗,
HAV基因工程疫苗正在研制中。
治疗:甲型肝炎为自限性疾病,经治疗可痊愈,不转慢
性亦不留后遗症。
;第二节 乙型肝炎病毒
乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)属嗜肝DNA病毒科(hepadnaviridae)。
HBV是乙型肝炎病原体,主要经输血、注射、性行为和母婴传播。起病徐缓,部分患者可转为慢性,少数还可导致肝硬化和肝癌。;HBV感染的分布; ①小球形颗粒:直径22nm,成分HBsAg,不含HBV DNA和DNA聚合酶,无感染性;
②管形颗粒:直径22nm,长度在50~700nm之间,成分HBsAg ;
③大球形颗粒:即Dane颗粒,直径42nm,具有感染性的完整病毒颗粒。;乙肝病毒的三种颗粒;完整的HBV颗粒亦称Dane颗粒,具有双层核衣壳结构,由内向外分为分为三部分:
核心:DNA和DNA多聚酶。
内衣壳:为HBcAg,在酶和去垢剂作用下可暴露 HBeAg 。
外壳(包膜):厚7nm。
双层脂质
蛋白质:含有HBsAg、PreS1和PreS2
;核心蛋白
HBcAg; 2、HBV基因结构
HBV DNA是由长链L (负链) 和短链S (正链) 组成的不完全双链环状
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