用第五章园林花卉的繁殖重点.ppt

一、组培的意义 快速、大量繁殖优良品种? 在花卉育种上和利用? 花卉的提纯复壮? 获得无病植株 种质资源的保存? 无机营养物 13种 有机物质 有机营养物质和生理活性物质 生长调节物质 生长素、细胞分裂素、赤霉素 其他附加物 琼脂 活性炭 抗生素 其他对生长有益的未知复合成分 大量元素+微量元素+铁盐+有机物质 药剂混合液 水+琼脂+加入糖 加入药剂混合液 加水定溶 PH调整 三角瓶 果浆瓶 洗净 干燥 分装 封口膜封口 塑料瓶 高压蒸汽灭菌 MS培养基 B5培养基 White培养基 N6培养基 KM-80培养基 温度 23-27℃ 光照　 湿度 　70-80%　　　 渗透压 1-2个大气压 PH值 5.8 气体 培养方法 固体培养法 液体培养法 外植体褐变及其防止 继代培养时材料的玻璃化 无病毒苗的培育 获得无病毒苗的技术 无病毒苗的鉴定 ??? 玻璃化 当植物材料不断地进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片往往会呈半透明和水渍状，这种现象称玻璃化。 ???呈现玻璃化的试管苗，其茎、叶表面无蜡质，体内的极性化合物水平较高，细胞持水力差，植株蒸腾作用强，无法进行正常移栽。这种情况主要是由于培养容器中空气湿度过高，透气性较差造成的?。?? 增加培养基中的 溶质水平，以降低培养基的水势 随着琼脂浓度的增加，玻璃化的比例明显减少。 减少培养基中含氮化合物的用量 增加光照强度增加容器通风，最好进行CO2施肥，这对减轻试管苗玻璃化的现象有明显的作用；?降低培养温度，温度主要影响苗的生长速度，降温有助于减轻试管苗玻璃化现象发生； ? 降低培养基中细胞分裂素含量，可以考虑加入适量脱落酸。 外植体褐变是指在接种后，其表面开始褐变，有时甚至会使整个培养基褐变的现象。它的出现是由于植物组织中的多酚氧化酶被激活，而使细胞的代谢发生变化所致。在褐变过程中，会产生醌类物质，它们多呈棕褐色，当扩散到培养基后，就会抑制其他酶的活性，从而影响所接触外植体的培养。 植物品种?? 生理状态?? 一般说来，处于幼龄期的植物材料褐变程度较浅，成年植株采收的外植体，由于含醌类物质较多，因此褐变较为严重。??? 培养基成分?? 浓度过高的无机盐会使某些观赏植物的褐变程度增加，此外，细胞分裂素的水平过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性，从而使褐变现象加深。 培养条件不当? 如果光照过强、温度过高、培养时间过长等，均可使多酚氧化酶的活性提高，从而加速被培养的外植体的褐变程度。 选择合适的外植体? 生长处于旺盛的外植体，褐变现象明显减轻。?合适的培养条件?? 无机盐成分、植物生长物质水平、适宜温度、及时继代培养均可以减轻材料的褐变现象。?使用抗氧化剂?? 使用半胱氨酸、抗坏血酸等抗氧化剂能够较为有效地避免或减轻很多外植体的褐变现象。使用0.1%-0.5%的活性炭?。 连续转移?? 对容易褐变的材料可间隔2-24小时的培养后，再转移到新的培养基上，这样经过连续处理7-10天后，褐变现象便会得到控制或大为减轻。 培养基及各种使用器具消毒不彻底 外植体灭菌时不彻底 操作人员人为因素带入 个人卫生 继代转接时瓶子外壁灰尘 操作不规范 环境不清洁 超净工作区域污染 定期清洗更换初过滤器 调节风速20-30m/min 操作台消毒 外植体灭菌过度 外植体太小 太嫩灭菌药剂的用量过大或时间过长 污染 培养基不适宜或配制有问题 培养环境恶化 改善培养环境 及时转移和分瓶 通过热处理法获得无病毒苗木：基本原理是，在高于正常的温度下，植物组织中的很多病毒可以被部分地或完全地钝化，但很少伤害甚至不伤害寄主组织。 茎尖培养脱毒 代谢活性高 无维管组织 高激素浓度 茎尖大小（决定茎尖存活率和脱毒效果）选择的原则是：外植体大到足以能够脱除病毒，小到足以能发育成1个完整的植株。故一般切取0.2~0.5mm，带一两个叶原基的茎尖作为繁殖