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第七章 色谱分析法 一、色谱法发展简史 茨维特的实验 茨维特： 俄国植物学家，主要从事植物色素的研究工作，在1906 年发表的文章中，首次提出了色谱的概念。 茨维特的实验 色谱法是一种分离方法。 它的特点是：有两相，一是固定相，一是流动相，两相作相向运动。 Chromatography 将色谱法用于分析中，则称为色谱分析。 色谱分析是一种分离、分析法。 二、色谱仪 色谱法分离理论 (一) 基本术语(二) 塔板理论(三) 速率理论(四) 分离度 色谱相关术语 关于色谱峰 关于保留值 关于分配平衡 关于色谱峰 关于保留值 死时间(tM): 无保留组分出峰时间 保留时间(tR): 调整保留时间(t’R): 死体积(VM): 保留体积(VR): 调整保留体积(V’R): 相对保留值(ri,s): 保留指数(I)：又叫Kovats，它规定正构烷烃的保留指数是其碳数的100倍，其它物质的保留指数在实际色谱条件下测定。选取与被测物相邻的两种正构烷烃做参照系，其中一种碳数为Z，另一种为Z+1，被测物的保留指数由下式计算： 关于分配平衡 分配系数K (distribution coefficient ) 分配比k又称为容量因子、容量比、分配容量，是指在一定温度和压力下，平衡状态时组分在固定相中的量与在流动相中的量之比值。是衡量柱子对组分保留能力的重要参数。 相比β 色谱柱内固定相和流动相体积之比 是柱型及结构的重要特征。 高效液相色谱 色谱法中的定性和定量方法 (一) 定性方法(二) 利用峰面积定量(三) 色谱法分析中生物样品的预处理 * * 色谱的分类 按 照 分 离 过 程 中 相 系 统 的 形 式 和 特 征 柱色谱法 平板色谱法 填充柱色谱法 毛细管色谱法 纸色谱法 薄层色谱法 依据色谱过程中流动相和固定相的物理状态 气相色谱法 液相色谱法 超临界流体色谱法 气固色谱法 气液色谱法 液固色谱法 液液色谱法 峰 峰高 基线 峰宽 半峰宽 峰面积 标准偏差σ