5.3 血红蛋白的提取和分离课件新 新人教版选修1.pptVIP

(1)在加样示意图中，正确的加样顺序是________________________________________________________________________。 (2)用吸管加样时，应注意正确操作，分别是①______________、②贴着管壁加样、③______________。 (3)等样品__________时，才加入缓冲液，待______________________接近色谱柱底端时，用试管收集流出液，每______________mL收集一管，连续收集。 【尝试解答】　(1)④→①→②→③ (2)不要破坏凝胶面　使吸管管口沿管壁环绕移动 (3)完全进入凝胶层　红色的蛋白质　5 【解析】　加样品时应严格按要求进行操作，吸管应贴着管壁，管口沿着管壁环绕移动，还应注意不要破坏凝胶面。等样品完全进入到凝胶层时，才加入缓冲液进行洗脱。 【探规寻律】　对分离效果的判断 (1)若血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整地随洗脱液缓慢流出，则装填成功，分离操作正确。 (2)若血红蛋白的红色区带歪曲、散乱、变宽，则说明分离效果不好，装填不成功。 【互动探究】　(1)凝胶色谱柱的装填应注意哪些事项？ (2)血红蛋白溶液是如何分离的？ 【提示】　(1)①装填前为了加速膨胀，可以加入洗脱液的湿凝胶，用沸水浴加热，优点是：节约时间，除去凝胶中可能带有的微生物，排除胶粒内的空气