氨氮残糖的检测.doc

糖的测定 1总糖的测定（铜量法） 1.1 原理：还原性糖类的醛基在碱性溶液中能将Cu还原成Cu＋，过量的铜在酸性溶液中与KI反应而析出I2，根据I2的消耗量即可算出糖含量。 1.2操作方法： 取上层清液1ml于三角瓶中，加水4ml，加6mol/L Hcl 5ml加热至沸，水解3分钟，冷却，加酚酞指示剂2－3滴，用4mol/L NaoH中至红色，加斐林A10ml,斐林B10ml然后加热煮沸3分钟，冷却，加30％KI 5ml，加2mol/L H2SO4 15ml。析出的碘用0.1mol/L Na2S2O3滴定，淀粉为指示剂，滴定至兰色消退。同时加斐林A10ml,斐林B10ml作一空白。 计算：空白一样品＝0.1mol/L Na2S2O3ml数查1ml表即得。 液糖消后总糖的测定方法同上。 2 比色法测糖（残糖） 2.1 原理：糖类与H2SO4脱水生成甲基呋喃，再与蒽酮的醇式异构物蒽酚缩合成兰绿色化合物，其显色程度与其含量成正比。 2.2 测定方法： 取滤清后的发酵液1ml于100ml容量瓶中，定容摇匀。取出1ml于试管中加入蒽酮试剂6ml摇匀后，置于沸水中加热10分钟显色，冷却，进行比色。检测波长为580mn，用1ml水及6ml蒽酮试剂同样操作，作为空白。氨氮的测定 1 原理：发酵液中的铵盐在用碱处理后析出NH3加热将NH3蒸出，并用硼酸吸附，根据所消耗的酸量，即可求得样品中氨氮的含量。 （NH4）2SO4＋K2CO3＝2NH3 ＋K2SO4＋H2O＋CO2 3NH3＋H3BO3＝（NH4）3BO3 （NH4）2BO3＋3HCI＝3NH4CI＋H3BO3 2测定方法： 在A中加入ml 2%H3BO3溶液，然后加入甲基红－溴甲酚绿混合指示剂3－4滴，。 在B中吸入ml发酵过滤清液，再加入有机硅消沫剂1－2滴，然后后加入1ml 10%氢氧化钠溶液，迅速，B置电热套中加热，。用蒸馏水冲洗管内壁及插管头，摇匀用0.02mol/L Hcl滴定，由蓝色滴至浅黄红色为止。 3注意事项： A 。 B 。 4 工艺要求： 4.1 中间样品测定误差上下 0.5，超过规定误差要复试原样品。 4.2 所用必须干净，上一班应为下一班做好准备工作。 4.3 计算公式： HCLml×0.02×14 ml 氨基氮的测定 1 原理： 样品中加入甲醛，使氨氮与甲醛结合，而使氨基酸的碱性消失，用碱来滴定羧基消耗的NaoH ml数计算氨基氮的含量 NH2 O N CH2 P－CH ＋HC RCH ＋H2O CooH H CooH N CH2 N CH2 R·CH ＋NaoH RCH ＋H2O CooH CooNa 2测定方法： 准确吸取样品5ml于三角瓶中，加水20ml左右，甲基红为指示剂加2滴，用0.05mol/L H2SO4调至红色，放置3分钟，再用0.07138mol/L NaoH，调至刚呈桔黄色，加入18％中性甲醛溶液10ml，放置10分钟，加酚酞4-5滴，用0.07138mol/L NaoH滴定至终点（本法测定结果包括氨基氮和铵氮）。 3计算结果： mol/L Naoh×NaoH×0.014×100 ml样品 0.0112×滴定ml数（g/L） ＝NH2－N％