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1.生根培养:将切除老根的洋葱或 大蒜的磷基置于盛水的小烧杯上, 于22-25℃下进行生根培养。 2.取材: 待根长到 5cm左右 时剪取根 尖2-3mm。 * 实验:观察根尖分生组织细胞有丝分裂 一、材料用具: 1、洋葱(或大蒜)根尖, 2、显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、滴管等, 3、解离固定液 :盐酸和酒精混合液(1:1) 4、龙胆紫溶液(或醋酸洋红液) 二、实验原理: 1、 高等植物体内,有丝分裂常见根尖、茎尖等分生区细胞。各个细胞的分裂是独立的。通过在显微镜下观察各个时期细胞内染色体(染色质)的存在状态,判断这些细胞各处于有丝分裂的哪个时期(间期、前期、中期、后期和末期)。 2、碱性染料(龙胆紫溶液或醋酸洋红液)能将染色体(或染色质)染成深色。 3、盐酸使植物细胞之间的果胶质层松散,用盐酸处理植物的根尖,可以使根尖细胞彼此容易分离。 三、实验步骤 磷 基 取材部位 看一看植物细胞的 分裂(根尖) 根冠 分生区 伸长区 成熟区 根尖纵剖结构示意图 3、装片的制作: 解离 漂洗 染色 制片 盐 酸 使植物细胞之间的果胶质层松散,细胞相互分离 放入请水中漂洗 洗去盐酸,便于碱性染料染色 龙胆紫溶液或醋酸洋红等碱性染料 使染色体着色,便于显微镜下观察 用镊子压扁,加盖玻片,再加载玻片压散细胞 使细胞分散开 观察 先用低倍镜观察 在低倍镜下找到分生区细胞;正方形、排列紧密 依次观察分裂中期、前期、后期、末期、的细胞间期、 再用高倍镜观察 4、显微镜观察: 思考: ⑴为何只截取根尖2—3mm? 有利于找到分生区细胞 ⑵解离的目的: 使组织中的细胞相互分离开。 ⑶漂洗的目的: 洗去药液,防止解离过度。 ⑷用碱性染料染色目的: 使染色质和染色体着色,便于观察。 ⑸制片的目的: 使细胞分散开(成一层细胞),利于观察。 (6)分生区的特点是什么? (7)本实验所观察到的细胞还能继续分裂吗? 细胞小,排列密而整齐,细胞壁薄,细胞核大,细胞质浓,无液泡。具有很强的分裂能力,能够不断的分裂产生新细胞,再由这些细胞分化形成其他组织。 原本细胞都是叠加在一起的,在显微镜下很难观察清楚,酒精和盐酸就是使细胞分散分离并杀死细胞,显微镜观察的是死亡的细胞那时处于的状态,所以,有的细胞正处于中期,有的处于间期。 镜检结果分析 进行有丝分裂的细胞分裂相 间期: 完成DNA分子的复制和 有关蛋白质 的合成。 镜检结果分析 间期分裂相图 前期: 核仁和核膜逐渐消失。 核内染色质逐渐浓缩为细长而卷曲的染色体,每一染色体含有两染色单体,它们具有一个共同的着丝点;两级发出纺锤丝形成纺锤体。 镜检结果分析 前期分裂相图 中期: 染色体形态、数目清晰,便于观察。 各染色体的着丝点排列在赤道板上,纺锤丝与染色体的着丝点相连。 镜检结果分析 中期分裂相图 后期:各染色体着丝点分裂为二,其每条染色 单体也相应地分开,并各自随着纺锤丝 的收缩而平均移向两极,每极有一组染 色体,数目和原来的相同。 镜检结果分析 后期分裂相图 末期:核膜、核仁重新出现,分开在两极的染色体各自组 成新的细胞核,在细胞中央出现细胞板形成新的细 胞壁,使细胞分裂为二,形成二个子细胞。这时细 胞又进入分裂间期。 末期分裂相图 实验结束后: 1、将盖玻片和载玻片擦洗干净。 2、显微镜复原,套上塑料袋。 3、整理试验台。 *
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