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第三讲生物安全实验室的设施和设备 各类实验室安全设备的要求 实验室安全设备主要有 生物安全柜 高压灭菌器 离心机安全罩 洗眼器 个人防护装备 生物安全柜biological safety cabinet,BSC 原理、等级和种类 使用实验室生物安全柜目的 1.确保工作人员不受实验对象侵染 2.保障公众健康 3.保护样品 为什么使用生物安全柜 国标要求操作有害实验生物因子必须在生物安全柜内进行 可以避免气溶胶扩散至室内外 可使工作面达到要求的洁净环境 国际通用 生物安全柜级别、种类和原理 生物安全柜 种类 BSC有三个级别,一共有六种。 Ⅲ级为密闭袖套操作,其余为前开口操作。 Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级BSC的差异 BSC-Ⅰ示意 BSC-Ⅰ级生物安全柜原理图 A 前开口 B 可视窗 C 排风HEPA过滤器 D 压力排风系统 BSC-II 美国 II级A1型 BSCII II级A2型 美国II级B1型 II级B1型 BSC- II级B2型 II级B2型 BSC-III BSC- III 生物安全柜的选择 生物安全柜的使用 1.正确安装,确保安全柜与外部排风系统压力平衡,保证安全柜处于正常工作状态。 2.定期维护和检测,确保安全性。 3.注意保洁,每天做完实验后,清除所有废弃物,再用75%酒精消毒。 4.一般滤膜有5-10年使用寿命,在仪器压力表显示压力为50%时候,需更换滤膜。 在生物安全柜上工作 在生物安全柜上工作 在生物安全柜上工作 在生物安全柜上工作 在生物安全柜上工作 在生物安全柜上工作 在生物安全柜上工作 在生物安全柜上操作 在生物安全柜上工作 在生物安全柜上工作 在生物安全柜上工作 维护、更换过滤器的清除微生物污染 在对安全柜进行维护、更换过滤器以及性能测试时,如果需要接触安全柜的污染部分时,则必须进行清除污染。 在进行认证测试以前,以及在进行气体消毒以前,应使用适当的消毒剂清除所有内部工作表面和暴露内表面的污染。 清除微生物污染 当安全柜已经操作过为二级,三类生物安全水平的危险因子时,在进行认证或测试以前需要对整个安全柜进行气体消毒。 当安全柜已经操作过为三级,二类生物安全水平的危险因子时,则应对整个安全柜进行气体消毒。 移动到另一地方之前的清除微生物污染 可能受生物因子污染的安全柜,在移动到另一地方之前应适当地清除污染 在研究试剂溢漏或沷洒以后,受污染表面应适当地清除污染 性能测试概述 HEPA过滤器泄漏 HEPA过滤器、过滤器外壳以及固定框架可以采用邻苯二甲酸二辛酯,DOP或其替代品来检漏,检漏时安全柜在标称风速下工作。 小 结 熟悉各级生物安全实验室的设施和设备要求; 掌握生物安全柜的原理、分类和使用。 所有物品离前窗至少2英寸,所有污染性的操作 尽量远离工作区域的后部。 干净和被污染的物品分开放置;被污染的物品尽量不要进入干净区域,应放置在工作区域的后部。 操作时物品和手臂不要穿过前窗。 干净的物品 理想的工作台摆放原则 清洁——污染区 在工作台面上的实验操作应该按照从清洁区到污染区的方向进行 被污染的区域 废弃物托盘 垃圾袋 避免使用明火,用适当的灭菌措施。 避免使用干扰安全柜内层流的实验手段。 如使用中有外溢,所有物品被拿走前必须经去污染处理。 安全柜必须处于操作状态时,才能彻底消毒内壁。 在生物安全柜内应避免使用明火。 --使用明火会对气流产生影响。 --特别在处理挥发性物品和易燃物品时,也易造成危险。 --在对接种环进行灭菌时,可以使用微型燃烧器或电炉,而不应使用明火。 明 火 工作结束后,安全柜继续开机2-3min吹扫工作区的污染物。 与污染物接触过的物品从生物安全柜中取出之前必须经表面去污处理。 所有的托盘或容器从安全柜中取出前必须盖上。 下样 用消毒剂清洁所有内壁,待其干燥。 定期抬起工作面清洁下面的区域;洗净抹布。 扔掉橡胶手套;适当洗涤工作服,用杀菌液彻底清洁手和手臂。 清洁 关闭灯、风机、关闭前窗,打开紫外灯。 关闭时先关送风机后关排风机。 关机 测试机构进行质量认证时,要求生物安全柜按相应程序进行测试,要做到 除了在测定标称风速时以外,厂家提供的安全柜内所有备选的可卸部件在测试时也必须安装到所在位置。 * 操作及应用 维修和监测 硬管 不适 不适 0 100 Ⅲ级 硬管 0.38 0.51 0 100 Ⅱ级B2型 硬管 0.38 0.51 30 70 Ⅱ级B1型 套管 0.38 0.4 70 30 Ⅱ级A2型 套管 0.38 0.4 70 30 Ⅱ级A1型 硬管 0 0.38
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