石蜡切片组织RNA提取精编.pptVIP

有关石蜡切片 石蜡切片（paraffin section）： 组织学常规制片技术中最为广泛应用的方法。石蜡切片不仅用于观察正常细胞组织的形态结构，也是病理学和法医学等学科用以研究、观察及判断细胞组织的形态变化的主要方法，而且也已相当广泛地用于其他许多学科领域的研究中。教学中，光镜下观察切片标本多数是石蜡切片法制备的。活的细胞或组织多为无色透明，各种组织间和细胞内各种结构之间均缺乏反差，在一般光镜下不易清楚区别出；组织离开机体后很快就会死亡和产生组织腐败，失去原有正常结构，因此，组织要经固定、石蜡包埋、切片及染色等步骤以免细胞组织死亡，而能清晰辨认其形态结构。 有关石蜡切片 石蜡切片法包括取材、固定、洗涤和脱水、透明、浸蜡、包埋、切片与粘片、脱蜡、染色、脱水、透明、封片等步骤。一般的组织从取材固定到封片制成玻片标本需要数日，但标本可以长期保存使用，为永久性显微玻片标本。 试剂、仪器及耗材 试剂、仪器及耗材 试剂、仪器及耗材 Most of the samples available for mutation analysis (and DNA extraction ) are FF-PET. The process of formalin fixation damages the DNA and causes reduced yields making subsequent DNA analysis more difficult. It is important therefore that you have a good DNA extraction method to extract as much usable DNA out of the samples as possible to maximise your chance of a successful mutation analysis. * Most of the samples available for mutation analysis (and DNA extraction ) are FF-PET. The process of formalin fixation damages the DNA and causes reduced yields making subsequent DNA analysis more difficult. It is important therefore that you have a good DNA extraction method to extract as much usable DNA out of the samples as possible to maximise your chance of a successful mutation analysis. * - * - ANNUAL BUSINESS REVIEW 从石蜡切片组织中提取RNA 董进曲/ Jinqu Dong 2013.12.26 概览 有关石蜡组织切片 样品处理 试剂及仪器 RNA 质控RNA 提取 RNA 质控 补：DNA石蜡组织 切片。 电泳 定量 Ambion1975 石蜡组织切片RNA提取：实验原理 二甲苯Ambion1975试剂盒： 蛋白酶K：消化与RNA结合的组蛋白 关键点： 二甲苯：溶解并去除石蜡 通过二甲苯的去蜡以及蛋白酶K使RNA从石蜡组织中裂解释放，并通过DNA吸附柱有效提取RNA. 后续分析困难 受破坏RNA（固定步骤） 降低RNA 得率 注：RNA降解 内容 1、样品处理 2、RNA抽提 有关石蜡组织切片 样品处理 试剂及仪器 RNA 质控RNA 提取 RNA 质控 补：DNA石蜡组织 切片。 电泳 定量 样品处理 存放位置, 使用情况, 是否返还 样品移交记录（实验室间） 实验室信息管理系统 Microsoft Excel 手写记录 组织蜡块 切片 提取及质检 RNA 实验/数据 RNA提取前 组织蜡块 切片 提取及质检 RNA 实验/数据 1.1 实验前的准备工作 1.1.1 打开超净台的紫外灯，灭菌15min，然后通风10min。 1.1.2 在第一次使用Wash1和Wash2/3之前，按照下列