组织学与胚胎学--绪论上皮1要点.ppt

* c. 单层柱状上皮(Simple columnar epithelium): 特点：由单层柱状细胞构成，细胞呈柱状（侧面观）或多角形（表面观），核长圆形、位于基底部。 分布：胃、肠、胆囊、子宫等处。 作用：吸收、分泌 * 杯状细胞(Goblet cell) :杯状。胞质顶部被大量分泌颗粒占据，颗粒内含粘液。胞核位于基部，小，染色深。分泌粘液，润滑表面。 * d. 假复层纤毛柱状上皮(pseudostratified Ciliated columnar epithelium): 分布于气管内表面。由柱状，梭形和锥体细胞构成，常夹有杯状细胞。 * 电子密度高: 当电子束投射到密度大吸附重金属多的结构时, 电子被散射的多, 因此, 射落到荧 光屏上的电子少而呈暗像, 电镜照片呈黑或深灰色, 称为电子密度高。反之称为电子密度低。 * 2.扫描电镜技术(SEM) a. 标本制作 不需制作超薄切片 b.染色 重金属盐染色 c. 超微结构 用于观察组织细胞表面结构，具有真实的立体感。 * * 3. EM的组织的制备与LM的相似，但有以下不同: a. 通常使用戊二醛和四氧化锇作双重固定。 b. 切片超薄 (厚度小于90nm)，塑胶包埋。 c. 用重金属盐如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此，所有 原始的电镜图片都是黑白的。 TEM：电子密度高、电子密度低 * * TEM显示胰腺腺泡细胞内部结构。 * 其它的显微镜技术 冷冻蚀刻(freeze etchine method) 观察细胞断裂表面结构 分析电镜 X射线显微分析术(X-ray microanalysis) 研究细胞、组织内元素含量及分布 * * 电镜: “两暗夹一明” C膜: * C. 特殊的染色方法: 1. 组织化学(Histochemistry, 细胞化学)法: 通过生物化学的 方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物，来显示 微细结构的位置，然后用显微镜观察。 PAS 反应: 用来显示多糖及糖蛋白的糖链的分布。先用过碘酸(Periodic acid )将多糖氧化，在多糖表面形成戊二醛结构，然后用无色亚硫酸品红( Schiff试剂) 还原戊二醛形成紫红色沉淀。 脂类显示法、核酸显示法、酶类显示法 * 肝脏的PAS染色 * 2. 免疫细胞化学(Immunocytochemistry)染色法: a. 待测结构或化学物质被看作抗原(Antigen)，通过非常敏感和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体(Antibody)结合，然后显示标记物，在原位产生不溶有色的反应产物，最后用显微镜观察。 * b. 2种基本染色法: * 直接法: 第一抗体被标记。 * 间接法: 第一抗体也被看作抗原，而第二抗体被标记。因为信号被放大，因此更加敏感。 3. 放射自显影(Autoradiography): 给细胞所要代谢的物质分子上标记放射性物质如 I125等，间隔照相，从而追踪该物质代谢途径。 * 4、细胞培养术和组织工程  细胞培养术 (cell culture) * 组织工程(tissue engineering)  是应用组织学方法和工程学原理在体外模拟构建机体的组织或器官的技术。基本要素： ①种子细胞  ②细胞外基质（生物学材料） ③信息分子 体外构建组织或器官移植于体内。 * 组织化学技术 (1) 一般组织化学(histochemistry)技术 ①原理 ：待检物＋试剂→有色沉淀（原位） ②常用技术： a.多糖和糖蛋白的糖链:过碘酸希夫（pariodic acid Schiff reactionPAS）反应 原理：多糖 过碘酸 多醛希夫试剂 紫红色沉淀 b. 脂类：苏丹、油红、尼罗蓝等 c. 酶 ：酶对底物作用原理 d. 核酸：盐酸处理，再用Schiff试剂检测 * PAS反应，小肠上皮杯状细胞的黏原颗粒 * 2. 免疫组织化学(immunohistology)技术 免疫细胞化学（immunocytochemistry)技术 根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中的肽和蛋白质. 特异性强、敏感度高。 用标记的抗体与组织中的抗原结合，标记物可于显微镜下观察。标记物有荧光素（荧光显微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶体金（多用于电镜观察） 分为：