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中药中黄曲霉毒素检测方法学习汇报中药中黄曲霉毒素检测方法研究真菌毒素简介是真菌在适宜的环境条件下,在食品或饲料里生长所产生的代谢产物,对人类和动物都有害真菌毒素简介毒素名称毒素来源毒性黄曲霉毒素(常见毒素)黄曲霉、寄生曲霉等肝毒性黄绿青霉毒素黄绿青霉神经毒性橘青霉毒素橘青霉肾毒性黄天精和环氯素岛青霉肝毒性T2毒素拟分枝镰刀菌和梨孢镰刀菌心衰、出血黄曲霉毒素的起源第一次发现黄曲霉毒素的起源事件:1960年,英国发现有10万只火鸡死于一种以前没见过的病,被称为“火鸡X病”,主要症状为食欲减退,羽翼下垂,染病后昏睡死亡,死时头脚向后伸。解剖可见肝出血、坏死,肾肿大。再后来鸭子也被波及。追根溯源,最大的嫌疑是饲料。这些可怜的火鸡和鸭子吃的是花生饼。花生饼是花生榨油之后剩下的残渣,富含蛋白质,是很好的禽畜饲料。科学家们很快从花生饼中找到了罪魁祸首,一种真菌产生的毒素。它被命名为“aflatoxin”,就是现在所说的黄曲霉毒素。黄曲霉毒素点击录入内容点击录入内容点击录入内容点击录入内容显微镜下的黄曲霉黄曲霉毒素的检测意义毒性极强1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织(WHO)的癌症研究机构划定为Ⅰ类致癌物,是一种毒性极强的剧毒物质,仅次肉毒霉素,是目前已知霉菌中毒性最强的。黄曲霉毒素的检测意义毒性极强急性毒性:比氰化钾大10倍,比砒霜大68倍。慢性毒性:肝脏损害,呈急性肝炎、出血性坏死、肝细胞脂肪变性和胆管增生。脾脏和胰脏也有轻度的病变。黄曲霉毒素的检测意义存在极其广泛主要存在于土壤,动植物及各种坚果中。家庭自制发酵食品等也经常发现黄曲霉毒素。一般在热带和亚热带地区,食品中黄曲霉毒素的检出率比较高。未能及时晒干或储藏不当的粮食容易产生,在农作物正常的生长期中也可以形成。黄曲霉毒素的检测意义存在极其广泛中药中容易产生黄曲霉毒素的有:种子、果实、粮谷类中药材或含此类药材的中成药;发酵类中药;贮存期中药材、中成药;油性成分多的中药材欧盟(μg/kg)德国(μg/kg)中国香港(μg/kg)中国(μg/kg)黄曲霉毒素AlfatoxinB1食用花生8,食用坚果、玉米、调味品5,食用干制水果及其制品2,生乳、热处理牛奶,婴幼儿食品0.1,婴幼儿奶粉0.1,婴幼儿食疗食品0.1.药材2药材5玉米、花生及其制品20,大米、植物油10,其他粮食、豆类、发酵食品5,婴幼儿配方食品5.药材5黄曲霉毒素AlfatoxinsB1,B2,G1,G2食用坚果、玉米、调味品10,食用干制水果及其制品4.药材4药材10药材10黄曲霉毒素的检测意义国际上对中药材中黄曲霉毒素的检测越来越多黄曲霉毒素的种类及性质根据在紫外线照射下产生荧光颜色的不同,分为B族和G族两大类及其衍生物ACCDPPTB族:蓝色荧光1G族:黄绿色荧光212黄曲霉毒素的种类及性质生长温度最低6-8℃,最高达44-46℃,32℃时黄曲霉毒素B1的产量最高。黄曲霉毒素的种类及性质化学结构结构类似,目前发现约20余种,已分离鉴定出12种:B1,B2,G1,G2,M1,M2,P1,Q,H1,GM,B2a和毒醇.基本结构:二呋喃环和香豆素,B1是二氢呋喃氧杂萘邻酮的衍生物.即含有一个双呋喃环和一个氧杂萘邻酮(香豆素).前者为基本毒性结构,后者与致癌有关.黄曲霉毒素的种类及性质化学结构B1,B2,G1,G2,M1,M2M1是B1在体内经过羟化而衍生成的代谢产物M1、M2主要存在于牛奶中B1:最常见、毒性及致癌性最强黄曲霉毒素化学结构式黄曲霉毒素化学结构式黄曲霉毒素化学结构式理化性质相对分子量为312-346难溶于水、易溶于油,甲醇、丙酮和氯仿等有机溶剂,但不溶于石油醚、己烷和乙醚中中性溶液及弱酸性溶液中较稳定,强酸性溶液中稍有分解,强碱溶液中分解迅速纯品为无色结晶.在紫外光灯下,B1、B2发蓝色荧光,G1、G2发绿色荧光耐高温,一般烹调温度不能破坏,B1的分解温度为268℃紫外线对低浓度黄曲霉毒素有一定的破坏性黄曲霉毒素现有检测方法介绍薄层层析法:灵敏度低,定量困难HPLC-紫外检测法:不衍生,灵敏度低,采用UPLC可以增强灵敏度HPLC-荧光检测法:需衍生,灵敏度高(目前药典采用此法)黄曲霉毒素现有检测方法介绍免疫化学分析方法酶联免疫吸附法:快速、简便、单一毒素、假阳性多免疫亲和柱-荧光分光光度法:高效、无毒、假阳性多微柱筛选法:半定量,测总量一步式黄曲霉毒素检测金标试纸法:快速、现场大批量初筛HPLC/MS/MS:不衍生,灵敏度高,假阳性少,成本高色谱学方法黄曲霉毒素现有检测方法介绍免疫学方法ELISA胶体金黄曲霉毒素现有检测方法介绍2005年增补本附录:第一次增加了黄曲霉毒素测定法历年中国药典标准收载状况2010年版一部正文:僵蚕、陈皮、酸枣仁、桃仁、胖大海品种项下增加了黄曲霉毒素残留量检查附录:继续收载了黄曲
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