昌增益生物化学课件第十章第四节1剖析.pptVIP

* 第四节 氧化磷酸化作用 oxidation phosphorylation 氧化磷酸化定义： 是指在ATP合酶的催化下，利用电子传递过程中释放的自由能，由ADP和Pi生成ATP的过程。 （底物水平磷酸化，光合磷酸化） ? 外膜： 可透性 内膜： 不透性 嵴 膜间隙 基质 线粒体的结构 一、氧化磷酸化与电子传递相偶联 （一）电子传递和氧化磷酸化依赖于底物氧化 1 琥珀酸 （FADH2） 2 ATP 1 苹果酸 （NADH） 3 ATP 呼吸链每消耗一个氧原子由ADP生成ATP的分子数，叫磷氧比（P/O） P/O可以反映呼吸效率。 （二） 氧化磷酸化必须以电子传递为前提 （三）氧化磷酸化推动电子传递 结论？ 二、电子传递和磷酸化的解偶联（uncoupling） 解偶联剂（uncoupler） 2,4-二硝基苯酚（2,4-dinitrophenol, DNP） （DNP） 作用实质：DNP为疏水性弱酸，易通过膜转移质子，消除跨膜质子梯度。 体内存在氧化磷酸化解偶联 生物学意义：产生热量保持体温 （新生少毛动物、冬眠动物 ） 由解偶联蛋白完成。 （产热素：thermogenin, dimer, 64-kd） 形成通道，允许质子从胞质流进线粒体基质。 三、氧化磷酸化的能量偶联机理 （一）化学偶联假说 1953 Slater提出。 高能中间物 （二）构象偶联假说 1964 Boyer 提出。 高能构象状态 （三）化学渗透假说（chemiosmotic hypothesis） 1961 Mitchell 提出（1978年获诺贝尔化学奖）。 质子电化学势 化学渗透假说 电子沿呼吸链传递伴随着H+从线粒体内膜基质“泵”到内膜外侧，从而在内膜两侧形成了跨膜的pH梯度（?pH）和电位梯度（??） ，二者合称为质子驱动力（proton-motive force, pmf），该驱动力使ADP和Pi形成ATP。 支持化学渗透学说证据： *线粒体内膜对H+、OH- 、K+、Cl- 等离子都是不通透性的； *电子传递中产生了跨线粒体内膜的质子梯度； *人为创造线粒体内外质子梯度，在没有氧化底物时也能合成ATP； *只有完整的线粒体内膜，才能进行ATP的合成； *破坏跨线粒体内膜的质子梯度和电位差，必然破坏氧化磷酸化进行。 四、F0F1-ATP合酶 （一）亚线粒体内膜重组实验 ? F1在体外具有ATPase活性； 在体内， F0F1具有ATP合成酶活性。 ATP synthase（F0F1-合酶） 合酶：具有裂解作用，但不是裂解酶，因为它能加强同一反应的合成方向 合成酶（synthetase）: 一种连接酶，所催化的反应需要核苷三磷酸。 （二）F0F1 - ATP合酶的分子结构 F1（?3?3???） 球形头部伸向基质； F0 （ ab2c12 ） 跨膜蛋白 *