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argR基因对钝齿棒杆菌发酵程中产精氨酸特性的影响 实验背景 argR基因是L-arg代谢途径中普遍存在的一个调控因子,但是不同的细菌argR基因有其特殊性。本实验测定了一株钝齿棒杆菌诱变菌和二株基因工程菌发酵过程中产L-arg曲线,生长曲线以及发酵液中碳源消耗量和PH值得变化,并据此总结出argR基因对菌体生长的调控作用。 谢谢大家!!! * * 近年来,褐藻胶的降解产物褐藻寡糖因其稳定性高,溶解性强等特点广泛应用医药,化工等行业。1糖可以作为生长调节剂,促进植物根部生长,延长植物生命周期。尤其是2-8糖。2 肿瘤,见论文;3 由于糖在植物体内具有信号分子的作用,能够诱导植物抗病基因的表达,抑制病原菌恩对生长,所以作为杀菌剂跟抑菌剂。 * 酶解法倍受青睐。于是,褐藻胶裂解酶受到越来越人的关注。 * Plackett-Burman实验设计是一种两水平、基于不完全平衡块原理的设计方法,可以最少的实验次数筛选出对实验结果影响较大的因素。响应面方法是通过合理的试验设计得到一定的数据,采用多元二次方程来拟合因素与响应值之间的函数关系,通过对回归方程的分析来寻求最优工艺参数,解决多变量交互影响的一种统计方法 * 吴书超 目录 实验方法 2 实验结果 3 实验结论 4 实验背景 1 实验方法 基因工程菌的构建 菌体的种子及发酵培养 发酵液中Arg含量,生长曲线,碳源消耗PH值变化的测定 实验结果 三株菌生长曲线图 图1 生长曲线 三株菌体生长曲线基本一致; A.S.M2.sp菌株生长情况明较 原菌株差;A.S.M2Δarg菌株 的生长情况较原菌株旺盛 72h后菌体生长出现差异 实验结果 发酵过程中Arg生成曲线 4h 三株菌体均在4h和45h后有两个产酸高峰期 70h左右三菌种产酸达到高峰期 产酸高峰期后Arg产量逐渐降低至零 45h 70h 实验结果 菌体发酵过程碳源及PH变化 三株菌株发酵过程中糖消量总体趋势基本一致; PH变化趋势基本一致,呈总体下降趋势, 实验结果 C.crenatumA.S.M2.sp 发酵过程中各参数的关系 还原糖含量总提呈下降趋势 菌体生长曲线表现出菌体四个生长期 Arg曲线表现出菌体有两个产酸期 PH值前期呈下降趋势,产酸期小幅上升并维持在5.8左右 实验结论 argR基因的缺失促进细胞的生长,使细胞生长维持在稳定期的时间更长。 argR基因过量表达却影响了细胞的正常生长,表现为菌体的生长速度较慢,细胞生长维持在稳定期的时间与原菌株相比,时间缩短。 argR基因过量表达导致 A r g产量的增加,由此推断argR基因可能是Arg代谢中的一个正调控因子,其过量表达有利于促进了A rg 生物合成过程中部分关键酶的转录,从而导致 A r g产量的增加。 * 近年来,褐藻胶的降解产物褐藻寡糖因其稳定性高,溶解性强等特点广泛应用医药,化工等行业。1糖可以作为生长调节剂,促进植物根部生长,延长植物生命周期。尤其是2-8糖。2 肿瘤,见论文;3 由于糖在植物体内具有信号分子的作用,能够诱导植物抗病基因的表达,抑制病原菌恩对生长,所以作为杀菌剂跟抑菌剂。 * 酶解法倍受青睐。于是,褐藻胶裂解酶受到越来越人的关注。 * Plackett-Burman实验设计是一种两水平、基于不完全平衡块原理的设计方法,可以最少的实验次数筛选出对实验结果影响较大的因素。响应面方法是通过合理的试验设计得到一定的数据,采用多元二次方程来拟合因素与响应值之间的函数关系,通过对回归方程的分析来寻求最优工艺参数,解决多变量交互影响的一种统计方法 * * *
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