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多功能液相芯片分析系统（Luminex技术） 常见的细胞因子检测方法 ELISA ELISpot 免疫学功能研究 缺点：一次实验只能检测一种细胞因子 PCR 原位杂交 流式细胞术胞内染色 缺点：一次实验检测的细胞因子种类有限；不能定量 多功能液相芯片分析系统的优势 同时检测几种甚至十种以上细胞因子 快速鉴定Th1/Th2特异性免疫应答 需要的样本量少（50ul；血清、血浆、培养上清等） 节省时间和经费 Luminex技术原理和优势 Luminex技术应用 Luminex相关试剂盒产品 主要内容 Luminex技术是在有色微球、激光技术、应用流体学及高速数字信号处理技术的基础上发展起来的一种多功能的液相分析平台。 基本概念 基本原理 捕获分子 待测分子 报告分子 捕获微球 聚苯乙烯材料，大小均一，直径5.6 um 标记了两种荧光染料，每种染料的浓度有10个梯度，通过调整两种染料的比例可以获得100种不同染色的微球 标记了针对检测物的捕获分子作为探针 每种微球的地址由两种红色荧光颜料的掺入比例唯一决定 颜色编码的微球 荧光微球 红色染料浓度逐渐增大 紫色染色浓度逐渐增大 捕获抗体-抗原-检测抗体夹心复合物 捕获微球的检测原理 检测原理 样本检测区 红光用于鉴定微球 绿光用于检测荧光信号的强弱 检测原理 在一个反应体系内测定多个指标 检测原理 检测原理 高通量检测：可对同一样本中的多种不同目的分子同时进行分析在35-60分钟内可对96个不同样本进行检测。 灵活性，可以随意组合检测指标 多元分析，操作简便，可以节约试剂、时间和精力 灵敏度高，重复性好 所用标本量少，尤其适合分析稀有样本 液相反应动力学，更快地达到平衡点，缩短实验时间 Luminex的技术优势 Luminex?技术 与固相芯片 重复性好，敏感性高 灵活性好 特异性高：因为只读微粒上的信号。 检测迅速: 液相悬浮杂交比固相扩散杂交快。 价格低：设备和试剂的价格都低于芯片。 成熟的技术：不需要进一步投入做产品研发。 Luminex技术与ELISA方法 高通量检测：用微量标本进行多个指标检测 比ELISA的灵敏度高100-10000倍 重复性好 操作简便、省时省力 液相芯片的应用 免疫学分析 细胞因子检测 受体－配体分析 酶分析 蛋白质－蛋白质相互作用分析 蛋白质－DNA相互作用分子 核酸研究 SNP检测 基因表达谱分析 Luminex检测体系的组成 Luminex仪器 Luminex 检测试剂 Luminex试剂盒 Luminex 附件 Luminex检测配套试剂盒 RD: Fluorokine MAP系列，主要检测各种细胞因子及MMP系列蛋白 Biosource：各种细胞因子、生长因子系列 Upstate: Beadlyte系列，主要检测细胞因子/趋化因子、信号转导相关蛋白及激酶的活性 Linco：各种细胞因子和趋化因子检测 Cayman：检测前列腺素E2 RD配套Luminex试剂盒 human IFN- g human IL-2 human IL-4 human IL-5 human IL-6 human IL-10 human IL-17 human TNF-a human TNF-? Human CCL系列 Human VEGF mouse GM-CSF mouse CCL2 mouse IFN-g mouse IL-1 ? mouse IL-2 mouse IL-4 mouse IL-5 mouse IL-6 mouse IL-10 mouse TNF-a mouse VEGF Biosource配套试剂盒 Human/Mouse Th1/Th2 Cytokines Human/Mouse Chemokines Human/Mouse Inflammatory Cytokines Human/Mouse Growth Factor Linco配套试剂盒 人/小鼠/大鼠 Cytokine/Chemokine 疾病相关研究试剂盒： 内分泌（糖尿病、肥胖病、垂体激素等） 脂肪组织分泌代谢 心血管疾病 皮肤疾病 细胞代谢 骨代谢等 Upstate配套试剂盒 各种总/磷酸化的信号转导蛋白 Human/Mouse/Rat Cytokines Human/Mouse Chemokines Human Growth factor