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第3章 生物信息的传递 上 ——从DNA到RNA 教学目的: 1. 掌握RNA转录的基本过程。 2. 熟悉RNA聚合酶的催化特点。 3. 熟悉原核生物与真核生物转录产物的异同。 4. 熟悉原核生物与真核生物mRNA的特征。 5. 了解真核生物RNA的转录后加工方式与过程。 教学重点: RNA转录的基本过程和RNA聚合酶的催化特点。 第3章 生物信息的传递 上 ——从DNA到RNA 3.1 RNA的结构、分类和功能 3.2 DNA转录的基本过程 3.3 RNA聚合酶 3.4 启动子与转录起始 3.5 原核生物与真核生物转录产物比较 3.6 原核生物与真核生物mRNA的特征比较 3.7 真核生物RNA的转录后加工 3.8 RNA的编辑、再编码和化学修饰 DNA序列是遗传信息的贮存者,它通过自主复制得到永存,并通过转录生成信使RNA、翻译生成蛋白质的过程来控制生命现象。 基因表达包括转录和翻译两个阶段。 转录是指拷贝出一条与DNA链序列完全相同的RNA单链的过程,是基因表达的核心步骤。 翻译是指以新生的mRNA为模板,把核苷酸三联遗传密码子翻译成氨基酸序列、合成多肽链的过程,是基因表达的最终目的。 编码链 有意义链 与mRNA序列相同的DNA单链。 模板链 反义链 指导mRNA合成的DNA单链。 不对称转录:RNA只转录DNA的模板链。 3.1 RNA的结构、分类和功能 RNA主要以单链形式存在于细胞中。碱基主要有A、G、C、U。 RNA链可自身折叠形成局部双螺旋。主要是A-U、G-C配对,偶而有G-U配对。RNA双螺旋的大小沟差异不大,不适合与蛋白质进行序列特异性相互作用。 RNA可折叠形成复杂的三级结构。RNA主链上的未配对区可自由旋转,以及不规则的碱基配对。 3.1.2 RNA的种类和功能 mRNA:编码了一个或多个多肽链序列。 tRNA:把mRNA上的遗传信息变为多肽中的氨基酸信息。 rRNA:是核糖体中的主要成分。 hnRNA:由DNA转录生成的原始转录产物。 snRNA:核小RNA,在前体mRNA加工中,参与去除内含子。 snoRNA:核仁小RNA,主要参与rRNA及其它RNA的修饰、加工、成熟等过程。 scRNA:细胞质小RNA在蛋白质合成过程起作用。 3.2 DNA转录的基本过程 RNA链合成的特点: 新链合成方向5→3。DNA模板链方向3→5。 以DNA双链中的反义链 模板链 为模板。 RNA聚合酶以四种核苷三磷酸 NTP 为底物。 DNA模板链与RNA链之间的碱基配对规则:A-U、T-A、G-C、C-G。 各核苷酸之间通过3, 5磷酸二酯键相连。 RNA聚合酶不需要引物,可从头合成RNA。 RNA链带有与DNA编码链相同的序列 U→T 。 RNA转录的基本过程:模板识别、转录起始、转录延伸和转录终止。 3.2.1 模板识别 模板识别是指RNA聚合酶与启动子DNA双链相互作用并与之相结合的过程。 启动子是基因转录起始所必需的一段DNA序列。 真核细胞中模板识别与原核细胞不同。 真核生物RNA聚合酶不能直接识别基因的启动子区,需要转录调控因子 辅助蛋白 按特定顺序结合于启动子上,RNA聚合酶才能与之结合并形成复杂的转录前启始复合物。 3.2.2 转录起始 RNA聚合酶结合到启动子上后,使启动子附近的DNA双链解旋并解链,形成转录泡以便底物核苷酸与模板上的碱基配对。 转录起始是RNA链上第一个磷酸二酯键的产生。 转录起始可分为3个阶段: RNA聚合酶全酶与启动子结合形成封闭复合物。 DNA构象改变,封闭复合物转变成开放复合物。 开放复合物与最初两个NTP结合形成磷酸二酯键,转变成RNA聚合酶、DNA和新RNA三元复合物。 3.2.3 转录延伸 当RNA聚合酶催化新生RNA链长达9~10核苷酸时,σ因子从全酶上脱落下来。 核心酶沿DNA模板链移动使新生RNA链不断伸长,这个过程称为转录延伸。 全酶构象是与DNA专一结合所要求的,核心酶就失去了对DNA特异性序列的识别和结合能力。 在延伸阶段,底物NTP不断被添加到RNA链的3-OH端。DNA双链不断解开,RNA新链继续延伸。 由核心酶、DNA和新生RNA组成的延伸复合物直到遇到转录终止信号时,才停止加入新的核苷酸。 3.2.4 转录终止 当RNA链延伸到转录终止位点时,RNA聚合酶不再形成磷酸二酯键,RNA-DNA杂合双链分离,DNA恢复双链状态,而RNA聚合酶和RNA链从模板上释放出来,这就是转录的终止。 转录的终止信号存在已经转录的RNA序列中,提供终止信号的这段DNA序列称为终止子。 终止子的主要特征:转录终止点前有一段富含G-C碱基对的回文序列,能形成茎环或发卡结构;其后有一段4~8个寡聚A序列。 转录终止分为不依赖ρ因子和依
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