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1.检测生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质 Ⅱ
1. 生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的检测、注意事项及相关的实验拓展
Ⅱ:理解所列知识和其他相关知识之间的联系和区别,并能在较复杂的情境中综合运用其进行分析、判断、推理和评价。
一.实验原理:
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如:
①.还原性糖的鉴定:
还原性糖+
②.脂肪的鉴定:
脂肪+
脂肪+
③.蛋白质的鉴定:
蛋白质+
④淀粉 +
斐林试剂
砖红色沉淀
苏丹Ⅲ
橘黄色
苏丹Ⅳ
红色
双缩脲试剂
紫色
碘
蓝色
二.目的要求:
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质
1、还原糖的检测和观察:
选材 应该选择含 量高.颜色 为
的植物组织,以苹果.梨为最好。
糖
白色或近于白色
制备组织样液:
制浆 过滤 取液
三.实验过程:
用一层纱布
可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明植物组织样液中含有还原糖。
注入2mL苹果组织样液
注入1mL刚配制好的斐林试剂
水浴加热约2min
显色反应
变成砖红色
50----650C的温水
甲乙液等量混匀
振荡、混合摇匀呈现蓝色
①还原糖有 乳糖 。
②试剂: . (甲液:0.1g/ml
的 , 乙液:0.05g/ml的 .)
甲乙液必须 后再加入样 液中, 。
③必须 。
葡萄糖,果糖,麦芽糖
用水浴加热
斐林试剂
NaOH
CuSO4
等量混合均匀
现配现用
注意事项:
④颜色变化:
浅蓝色
棕色
砖红色
2、脂肪的检测和观察:
圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在。
方法一:待测组织样液+苏丹Ⅲ染液→橘黄色
取材:切片:
花生种子(浸泡3~4h),将子叶削成薄片
方法二:制作子叶临时切片,用显微镜观察
子叶细胞的着色情况。
①取最理想的薄片
②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液(2~3min)
③去浮色(用50﹪酒精)
④ 制成临时装片
低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒,
然后用高倍镜观察
注意事项:
①切片要薄,如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。
②酒精的作用是: 。
③需使用显微镜观察
④ 使用不同的染色剂染色时间不同
颜色变化: 。
洗去浮色
橘黄色或红色
3、蛋白质的检测和观察:
选材 应该选择含 丰富的
豆浆或鸡蛋清溶液。(避免材料自身 的颜色对实验变化颜色的掩盖)
蛋白质
黄豆浆滤液或蛋清稀释液
制备组织样液
显色反应
组织样液2mL
双缩脲试剂A液1mL
双缩脲试剂B液4滴
摇匀后变成紫色
说明组织样液中存在蛋白质。
创设碱性环境
(3)注意事项:
①试剂: (
A液:0.1g/ml的 ;
B液: 0.01g/ml的 )
先加 ,再加 。
B液要求量适中
双缩脲试剂
A液1ml
B液4滴
NaOH
CuSO4
蛋白质的检测结果
③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释,以免
实验后粘住试管壁,不易洗刷
原因:多余的B液将会与A液发生反应生成
Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色。
斐林试剂与双缩脲试剂的比较:
A液:0.1g/mLNaOH
B液:0.01g/mLCuSO4
甲液:0.1g/mLNaOH
乙液:0.05g/mLCuSO4
紫色物质生成
砖红色沉淀
先加A液,再加B液,不需加热
甲液与乙液先混再用,且现配现用,需加热
蛋白质
还原性糖
有效成分氢氧化铜 有效成分铜离子
4、淀粉的检测和观察:
取材:
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