Chapter11RegulationofGeneExpressionineukaryotes精编.ppt

Chapter 11 真核生物基因表达的调控 第一节 概述 一、真核生物基因表达调控的特点 1、多层次 2、无操纵子和衰减子 3、个体发育复杂 4、受环境影响较小 二、基因表达的时间性及空间性 　　1.时间特异性 　　按功能需要，某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生，这是基因表达的时间特异性。多细胞生物基因表达的时间特异性又称阶段特异性。 　　2.空间特异性 　　在个体生长全过程，某种基因产物在个体按不同组织空间顺序出现，这就是基因表达的空间特异性，又称细胞特异性或组织特异性。 三、真核生物基因表达调控的 层次： 1、DNA水平调节 2、 转录水平调节 3、转录后水平的调节 4、翻译水平调节 5、翻译后加工的调节 DNA 转录初产物RNA mRNA 蛋白质前体 mRNA降解物 活性蛋白质 DNA水平调节 转录水平调节 转录后水平的调节 翻译调节 mRNA降解的调节 翻译后加工的调节 核 细胞质 第二节 DNA水平的基因表达调控 一、染色质结构影响基因转录 常染色质（euchromatin）---基因可以转录 异染色质（hetrochromatin）---基因不能转录 活性基因置于异染色质内会失活 位置效应（Position effect）：指基因转移到基因组上新位置而引起基因表达的改变 异染色质化：基因组某些区域 被组装成高度压缩的异染色质的过程 巴氏小体：哺乳类雌体细胞1条X染色体异染色质化 （雌性X染色体基因表达的蛋白质可能是雄性的两倍） 剂量补偿：女性两条X染色体的作用与男性一条X染色体基因产物剂量平衡的现象 二、DNase Ⅰ的敏感性和基因表达 转录活跃区域对核酸酶的敏感度增加 1、DNaseⅠ超敏感位点（hypersensitive site）： 具有转录活性的基因周围的DNA区域对DNaseⅠ降解高度敏感。 2、特点： （1）一般在转录起始点附近，即5’启动子区域 （2） 低甲基化区 （3）不存在核小体结构 （4）裸露易与反式作用因子结合 三、组蛋白修饰与基因表达调控 （一）组蛋白的修饰： 乙酰化 / 去乙酰化 （Lys） 转录增强 / 抑制 甲基化/去甲基化（Lys, His, Arg）转录增强或抑制 磷酸化/去磷酸化（Ser, His） 哈佛大学施洋 ---- 组蛋白去甲基化酶 泛素化/去泛素化 ADP-核糖基化/ 去ADP-核糖基化 （二）组蛋白乙酰化 1、两种酶 （1）组蛋白乙酰转移酶(Histone acetyl-transferase) 催化组蛋白乙酰化，将乙酰基转移到组蛋白N端赖氨酸的ε-氨基上 乙酰基供体：乙酰辅酶A （2）组蛋白去乙酰酶(Histone deacetylase): 去除乙酰基团 2、组蛋白乙酰化与基因表达调控 （1）关系： 组蛋白的高乙酰化是活跃转录染色质的一个标志，而低乙酰化则与转录抑制有关 （2）机理： 乙酰基转移到组蛋白 N端赖氨酸的ε-氨基上，中和了其正电荷，增加了疏水性，削弱了DNA 与组蛋白的相互作用，有利于转录因子与DNA 的结合，促进转录 四、DNA 甲基化 (一）甲基化酶: 1、维持性甲基化酶(日常型甲基化酶)： 在DNA复制时, 可识别新合成的半甲基化双链,并将甲基加到新链的非甲基化胞嘧啶上; 2、从头合成型甲基化酶： 不需要甲基化的DNA 模板作指导, 可以直接使非甲基化的DNA 甲基化 （二）原核细胞的DNA甲基化 1、限制修饰系统 （1）限制外源DNA： 限制性内切酶切断外源DNA（保护机制） （2）保护自身DNA： 通过内切酶识别位点特定碱基的甲基化保护自身DNA，每一种DNA内切酶都有一个相关的甲基化酶 2、Dam甲基化 （1）DNA腺嘌呤甲基化酶：识别序列GATC （2）作用： a、错配修复：识别母链，修正子链 b、转录调节：如抑制转座酶基因的转录， 抑制转座 3、Dcm甲基化（作用不清楚） （三）真核细胞DNA 甲基化 1、甲基化部位： 胞嘧啶（C） 5-甲基胞嘧啶（5-mC） （1）脊椎动物：5’-CG-3’ （2）植物（两种基序）： 5’-CG-3’， 5’-CNG-3’ （3）CpG岛： 富含未甲基化的CpG的一段DNA，一般位于基因启动子附近 特点： a、1~2kb； b、位于基因5’端； c、富含未甲基化的CpG二核苷酸基序 2、甲基化的作用： （1）基因表达调控的一种方式 （2）抑制外源基因的表达 （3）抑制转座子、反转座子的活动 D