分子生物学RNA的生物合成要点.ppt

第11章 RNA的生物合成 RNA Biosynthesis ( Transcription ) 在生物界，RNA合成有两种方式： ?一是DNA指导的RNA合成，也叫转录，此为生物体内的主要合成方式，也是本章介绍的主要内容。 另一种是RNA指导的RNA合成(RNA-dependent RNA synthesis)，也叫RNA复制(RNA replication), 由RNA依赖的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase)催化，常见于病毒，是逆转录病毒以外的RNA病毒在宿主细胞以病毒的单链RNA为模板合成RNA的方式。 转录 (transcription) 是生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 转录 复制和转录的区别 参与转录的物质： 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板: DNA 酶 : RNA聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol) 其他蛋白质因子 原核生物转录的模板和酶 Templates Enzymes in Prokaryotic Transcription 第一节 一、原核生物转录的模板 DNA分子上转录出RNA的区段，称为结构基因(structural gene)。 转录的这种选择性称为不对称转录(asymmetric transcription)，它有两方面含义：在DNA分子双链上，一股链用作模板指引转录，另一股链不转录；其二是模板链并非总是在同一单链上。 5′···GCAGTACATGTC ···3′ 3′··· c g t g a t g t a c a g ···5′ 5′···GCAGUACAUGUC ···3′ N······Ala · Val · His · Val ······C 编码链 模板链 mRNA 蛋白质 转录 翻译 DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链(template strand)，也称作有意义链或Watson链。相对的另一股单链是编码链(coding strand)，也称为反义链或Crick链。 5? 3? 3? 5? 模板链 编码链 编码链 模板链 结构基因 不对称转录 二、RNA合成由RNA聚合酶催化 （一）RNA聚合酶能直接启动RNA链的合成 DNA依赖的RNA聚合酶催化合成RNA； RNA合成的化学机制与DNA依赖的DNA聚合酶催化DNA合成相似。 ( NMP )n + NTP → ( NMP ) n+1 + PPi RNA 延长的RNA DNA聚合酶在启动DNA链延长时需要引物存在，而RNA聚合酶不需要引物就能直接启动RNA链的延长。 RNA聚合酶和DNA的特殊序列——启动子(promoter)结合后，就能启动RNA合成。 （二）RNA聚合酶由多个亚基组成 核心酶 (core enzyme) 全酶 (holoenzyme) 转录起始阶段 转录延长阶段 　　其他原核生物的RNA聚合酶，在结构、组成、功能上均与E.coli相似。 　　原核生物的 RNA聚合酶都受一类抗 结核药利福平或利福霉素的特异性抑制。这类药物能与RNA聚合酶的?亚基特异结合，从而影响酶的活性。 三、RNA聚合酶结合到DNA的启动子上起动转录 转录是不连续、分区段进行的。 每一转录区段可视为一个转录单位，称为操纵子(operon)。操纵子包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。 RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合: 调控序列中的启动子是RNA聚合酶结合模板DNA的部位，也是控制转录的关键部位。原核生物以RNA聚合酶全酶结合到DNA的启动子上而起动转录，其中由σ亚基辨认启动子，其他亚基相互配合。 对启动子的研究，常采用一种巧妙的方法即RNA聚合酶保护法。 RNA 聚 合 酶 保 护 法 开始转录 T T G A C A A A C T G T -35 区 (Pribnow box) T A T A A T Pu A T A T T A Py -10 区 RNA-pol辨认位点 (recognition site) 用RNA聚合酶保护法研究转录起始区 原核生物启动子保守序列 原核生物启动子 －35区：一致性序列为TTGACA 是RNA-pol的辨认位点 －10区：一致性序列为TATAAT 又叫Pribnow盒 是RNA-pol的结合位点 1.不对称性 对某一特定的基因来说,只能以DNA双链中 的一条链为模板进行转录 2. 连续性 RNA的转录不需要引物 3.单向性 4.有特定的转录起始点和特定的终止位点 转录的特点 原核生物的转录过程 The Proc