基本操作程序第3课时要点.ppt

找出以下问题答案，背课本11页---13页内容。 1.基因工程的核心？构建基因表达载体的目的？ 2.一个基因表达载体由几部分组成？ 3.启动子？终止子？标记基因的作用？ 4.所有的基因表达载体的构建是一样的吗？为什么？ 5.实施基因工程的第三步是什么? 6.什么叫转化？ 7.将目的基因导入植物细胞的方法？ 8.农杆菌有什么特点？ 叙述农杆菌转化法的过程。 9.将目的基因导入动物细胞的常用方法？操作步骤？ 10.原核生物作为受体细胞具有的特点（优点）？ 11.大肠杆菌作为受体细胞最常用的转化方法？ * 基因表达载体的组成： 它们有什么作用？ 目的基因 启动子 终止子 标记基因 ①载体与表达载体的区别：二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构。 注意 ②用到的工具酶：既用到限制酶切割载体，又用到DNA连接酶将目的基因和载体拼接，两种酶作用的化学键都是磷酸二酯键。 ③启动子、终止子对于目的基因表达必不可少。 ④目的基因不能单独进入受体细胞，必需以表达载体的方式携带进去。 第三步 将目的基因导入 植物细胞 将目的基因导入 动物细胞 将目的基因导入 微生物细胞 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 ——显微注射法 ——感受态细胞法 （Ca2+处理法） 农杆菌有什么特点？ 转化过程: Ti质粒 目的基因 构建 表达载体 导入