银鲳对环境盐度适应范围的研究要点.pptVIP

银鲳对环境盐度适应范围的研究 Shanghai Fisheries University 研究基础 目录 立论依据 课题来源、研究内容和拟解决的关键问题 实施方案 1 2 3 4 5 可行性分析和预期目标 6 进度安排 7 经费来源与开支预算 1. 课题的研究目的和意义 立论依据 2.国内外研究现状分析 课题研究目的和意义 环境压力 环境压力 捕捞强度的增加、自然环境的污染 恶果 银鲳群体组成趋向低龄化，小型化 对策 开展银鲳人工繁殖及其苗种培育 现状 银鲳人工繁育技术不成熟，成活率低 方法 掌握银鲳的盐度适应水平,调控银鲳的生长发育 恶果 对策 现状 方法 国内外研究状况 总体情况： 对银鲳的研究主要集中在中国、日本、科威特等有银鲳资源的一些国家，其中又以中国和科威特的研究工作较多。研究内容涉及到鲳属鱼类分类、繁殖洄游及资源评估、食性及营养、遗传多样性、人工繁殖及苗种培育等诸多方面。 国内对鲳属鱼类的研究始于上世纪80年代，从鲳属鱼类的分类到繁育生物学进行了大量的研究 。 银鲳人工繁殖研究最早起始于上世纪60年代。 鲳属鱼类：银鲳、中国鲳、灰鲳或燕尾鲳、翎鲳、珍鲳、高丽鲳或鐮鲳； 分类依据：鳍的形态、鳍条鳍棘数目、脊椎骨数目、鳃耙数目 、头部后侧方侧线管的位置 、吻的形态 、骨骼系统、耳石结构及食道侧囊， 科威特：人工育苗方面，虽有育苗成功的事例，但幼鱼阶段成活率只达到1.5%，尤其在6～8天，其死亡率达到90%；过后通过改善饵料条件加入薇藻后，将孵化12天后的成活率提高到10%左右，远未达到大规模生产的需求。 国内：在银鲳的繁殖季节、性腺发育、卵细胞发育特点、繁殖环境条件需求及繁殖特性进行了深入研究； 施兆鸿采用人工授精以及人工育苗方法成功培育出了4cm的银鲳幼苗，成活率达14.1%，取的了突破性进展。 盐度作为水产养殖环境的一个重要理化因子,与养殖动物的渗透压、生长、发育关系密切。它对水产养殖动物生长发育影响机制的研究主要集中在渗透压、胚胎发育、鳃、肝、肾组织学变化、成活率变化以及半致死浓度、呼吸代谢等方面。 在生化组成上，通过对鲳属鱼类的生化组成差异，进行聚类分析，了解鲳属鱼类的系统进化，判断银鲳的分类地位； 研究银鲳对骤变盐度的应激反应，确定其体内应激荷尔蒙基因差异性表达与存活时间的关系。 研究内容 课题来源、研究内容和拟解决的关键问题 课题来源：上海市科学技术委员会科研计划项目 在分子水平上，通过对某特定基因序列进行PCR扩增，对比序列的差异及遗传结构，确定银鲳的分类地位； 拟解决的关键问题 以已知牙鲆cDNA序列为基础，获取银鲳相同的基因信息。进而获得牙鲆和银鲳该基因的结构和启动子序列及调控信息； 根据半数致死浓度建立耐盐评价指标； 建立 RH,UI,UII 基因定量表达的研究方法, 对这些基因在鱼特异性组织中盐度变化的差异表达进行定量分析。 研究基础 目前拥有仔、稚鱼发育过程中的相关实验材料； Content Title Content Title 学院中心实验室拥有冷冻离心机、高级研究成像显微镜系统等较为先进的相关实验设备； 导师吕为群教授长期从事鱼类环境适应性的相关研究，并且吕老师以前所在实验室在相关研究领域的研究处于世界领先地位。 本实验室研究中，对牙鲆尾垂体神经细胞的基因表达、荷尔蒙分泌以及其电生理图谱进行了研究分析，证实鱼尾垂体功能与渗透压调节有关。 现有实验条件 本实验室所具备有关的基础条件和设备：PCR仪、纯水系统、水浴锅、生物安全柜等仪器和条件，足以保证试验的顺利进行； 实验三 对鲳属鱼类肌肉进行生化分析，对其常规营养进行测定，并测量脂肪酸、氨基酸的组成，分析5种鲳属鱼类的肌肉脂肪酸和氨基酸差异变化，建立聚类分析树。 实验方案 实验二 我国5种鲳属鱼类肌肉生化组成差异分析 实验一 实验三 我国5种鲳属鱼类COII基因片段序列差异分析 银鲳幼鱼对盐度的应激荷尔蒙变化分析 根据COII基因片段序列设计引物，采用PCR技术扩增，对序列进行差异性分析，建立系统进化树，与实验一的聚类分析进行比较，确定银鲳种。 利用荧光定量Real-time quantitative PCR技术，根据己知的cDNA序列设计特异引物，以β-actin和18sRNA基因表达为参照,并确定定量表达的最佳反应条件。利用Trizol和 Superscript从组织中提纯RNA和合成第一链cDNA, 进而对UI、UII、CRH基因表达进行定量分析。 可行性分析和预期目标 导师吕为群教授以前所在的实验室对鱼类环境适应性大量的研究工作，并处于领先地位。 本课题以水产与生命学院中心试验室和我们环境适应性试验室为依托，拥有较为先进的实验设备和完善的实验条件，能够为本课题的顺