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肝组织切片分析-网状纤维染色 A.空白组大鼠肝组织(FR 200倍) B.模型组大鼠肝组织(FR 200倍) C. SOD组大鼠肝组织(FR 200倍) D. TAT-SOD组大鼠肝组织(FR 200倍) E. GST-TAT-SOD组大鼠肝组织(FR 100倍) 无纤维化 纤维化严重 * 实验结论-主要结论 重组SOD用于抗自由基疗法治疗慢性肝炎效果显著。 GST-TAT-SOD疗效最佳——跨膜能力与GST辅助作用的 完美结合。 重组SOD可抑制四氯化碳腹腔注射所致的细胞膜脂质过氧化,长期使用重组SOD能提高肝脏抗氧化功能。 * PTD-SOD口服吸收效果研究 * 实 验 过 程 设 计 制备PTD-SOD和对照蛋白SOD 离体实验 小鼠实验 通过酶活测定及SDS方法探讨PTD-SOD及SOD对蛋白水解酶的耐受性。 通过浓度曲线,时间曲线探讨PTD-SOD及SOD口服吸收效果。 实时荧光定量PCR方法研究小鼠体内SOD基因表达。 确认小鼠口服外源PTD-SOD后小鼠体内SOD酶活的增加,初步探讨口服吸收外源SOD后小鼠机体SOD基因表达量变化。 * 1 SOD与PTD-SOD口服吸收效果 1.1 不同剂量SOD及PTD-SOD口服吸收效果 1.2 不同时间SOD及PTD-SOD口服吸收效果 1.3 一周口服SOD及PTD-SOD效果 1.4 口服PTD-SOD对各分型SOD活力的影响 * 1.1 不同剂量SOD口服吸收效果 图1 不同剂量SOD口服吸收效果 A:空白组;B:15000U/天/只; C:6000 U/天/只;D:1500 U/天/只 注:*表示与空白组相比P<0.05 714±22 719±12 706±10* 741±27 脑 2016±60 2021±36 2006±51 2018±86 心 4184±524 4225±275 4436±133 4468±224 肝 * 1.1 不同剂量PTD-SOD口服吸收效果 图2 不同剂量PTD-SOD口服吸收效果 A:空白组;B:15000U/天/只; C:6000 U/天/只;D:1500 U/天/只 注:**表示与空白组相比P<0.01, *表示与空白组相比P<0.05; △△表示与高剂量组相比P<0.01,△表示与高剂量组相比P<0.05; ▼表示与中剂量组相比P<0.05 1543±77 1555±50 1577±52 1661±40**△△▼ 心 786±28 820±40 835±38** 807±40 脑 4753±133 4952±157* 5187±215**△ 5234±147**△△ 肝 * 小结 PTD-SOD对脏器中SOD活力提高效果优于SOD 。 存在最适剂量 * 1.2 不同时间SOD及PTD-SOD口服吸收效果 表1 口服SOD对各组织SOD活力的影响 表2 口服PTD-SOD对各组织SOD活力的影响 时间点 脑组织(U/mL) 心脏组织(U/ mL) 肝脏组织 (U /mL) 0h 737±24 1669±64 5238±38 2h 724±19 1719±60 5409±142* 4h 789±12** 1796±77* 5649±116**△ 6h 780±29* 1768±55* 5553±99* 注:**表示与0h组相比P<0.01;*表示与0h组相比P<0.05; △表示与2h组相比P<0.05 时间点 脑组织(U/mL) 心脏组织(U/mL) 肝脏组织(U/mL) 0h 679±20 1620±48 5004±197 2h 683±38 1622±40 4997±128 4h 699±26 1648±20 5210±168 6h 688±80 1672±27* 5153±116 PTD-SOD口服效果明显优于SOD; PTD-SOD口服效果具有时间依赖性,灌胃4 h后达到最大。 * 1.3 一周口服SOD及PTD-SOD效果 图3 长期口服SOD及PTD-SOD效果 注:*表示与空白组相比P<0.05 ,**表示与空白组相比P<0.01; △ 表示与SOD组相比P<0.05 ,△△表示与SOD组相比P<0.01 650±37 687±21 713±20* 1482±34** △ 1372±52 1417±42 4656±170 5012±136 ** △△ 4759±107 脑 肝 心 * 1.3 长期口服SOD及PTD-SOD效果 图4 长期口服SOD及PTD-SOD 对小鼠MDA含量影响 a:血清;b:肝
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