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2014版浙江生物高考专题二轮课件专题四第4讲基因工程研讨
第4讲 基因工程 一、基因工程的基本工具 1.限制性核酸内切酶的作用: ___________DNA分子内一小段特殊的核苷酸序列。 2.DNA连接酶的作用: ____________,形成重组DNA分子。 3.质粒: (1)化学本质:________________。 (2)作用:_______________。 识别和切割 缝合DNA片段 双链环状DNA分子 基因工程的载体 二、基因工程的基本操作步骤 (1)写出步骤①②的名称: ①________________; ②_______________。 形成重组DNA分子 目的基因的表达 (2)获得目的基因通常用的方法有:_____________、PCR扩增、 _________________。 (3)过程①用到_______________酶和________酶;前者用来切 割目的基因和载体,后者用来连接目的基因和载体。 (4)常用的受体细胞有:_________、枯草杆菌、酵母菌和_____ _______等。 (5)筛选的原因是并不是所有的细胞都接纳了重组DNA分子。 化学方法合成 从基因文库中寻找 限制性核酸内切 DNA连接 大肠杆菌 动植 物细胞 1.(2012浙江高考·T6D)将目的基因B直接导入大肠杆菌,然后 感染并转入玫瑰细胞。 ( ) 分析:目的基因必须形成重组DNA分子,才能导入受体细胞,否则 不能正常表达。 2.(2011浙江高考·T6B)每个重组质粒中至少含有一个限制性 核酸内切酶识别位点。 ( ) 分析:质粒作为载体的条件之一就是应含有一至多个限制性核 酸内切酶切割位点,以便于插入目的基因。 × √ 3.(2011四川高考·T5D)应用DNA探针技术,可以检测转基因抗 冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达。 ( ) 分析:应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的 基因的存在及其是否转录,但不能检测其是否表达。 4.(2010江苏高考·T18C)动物的生长激素基因转入植物体后不 能表达。 ( ) 分析:不同生物的基因具有相同的化学成分和空间结构,合成蛋 白质时共用一套密码子,因此动物基因可以在植物体内表达。 × × 5.(2010江苏高考·T18B)种植转基因抗虫植物不会导致害虫群 体抗性基因频率的增加。 ( ) 分析:种植转基因抗虫植物会使不具抗性基因的害虫大量死亡, 导致抗性基因频率增加。 × 热点考向1 基因工程的工具酶和载体? 【典例1】(2013·绍兴模拟)下列有关基因工程的说法正确的是 ( ) A.DNA连接酶可把目的基因与载体的粘性末端形成氢键 B.用氯化钙处理大肠杆菌,可增加其细胞膜的通透性 C.限制性核酸内切酶能切断DNA中磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键 D.用质粒中的抗生素抗性基因可以筛选出含有重组DNA的植物细胞 【解题探究】 (1)DNA连接酶的作用及形成的化学键。 ①作用:______________________。 ②形成的化学键:_____________________。 提示:①将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起 ②磷酸二酯键 (2)限制性核酸内切酶的作用及作用的化学键。 ①作用:_____________________。 ②作用的化学键:_____________________。 提示:①识别和切割DNA分子内一小段特殊核苷酸序列 ②磷酸二酯键 【解析】选C。A项中,DNA连接酶可把目的基因与载体的粘性末端形成磷酸二酯键。B项中,用氯化钙处理大肠杆菌,可增加其细胞壁的通透性。C项中,限制性核酸内切酶在识别部位切断DNA中磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键。D项中,用质粒作为载体,宿主细胞应该选择大肠杆菌;用质粒中的抗生素抗性基因,可以筛选出含有重组DNA的大肠杆菌细胞。 【总结提升】与核酸有关的酶的作用辨析 切割某种特定的 脱氧核苷酸序列 反转录、 基因工程 以RNA为模板合成DNA 反转录酶 DNA复制 使碱基间氢键断裂形成脱氧核苷酸链 解旋酶 转录 在核糖核苷酸链上添加单个核糖核苷酸 RNA 聚合酶 DNA复制 在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧核苷酸 DNA 聚合酶 限制性核 酸内切酶 基因工程 连接DNA片段 DNA连接酶 参与的生理过程及应用 作用 名称 【变式训练1】如下图,已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段(假设所用的酶均可将识别位点完全切开),下列各种酶切位点情况中,可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是 ( ) A.1为EcoRⅠ,2为BamHⅠ,3为EcoRⅠ,4为PstⅠ B.1为BamHⅠ,2为Eco
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