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固相萃取技术概述 一、固相萃取的原理 固相萃取(Solid Phase Extraction,SPE）就是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附，达到分离和富集目标化合物的目的。?? 二、固相萃取的优点 (1) 简单、快速和简化了样品预处理操作步骤, 缩短了预处理时间。 (2) 处理过的样品易于贮藏、运输 ,便于实验室 间进行质控。 (3) 操作条件温和,适应的pH范围广。 (4) 不出现乳化现象 ,提高了分离效率。 (5) 仅用少量的有机溶剂 ,降低了成本。 (6) 易于与其他仪器联用 ,实现自动化在线分析。 三、 固相萃取的分类 按照选用吸附剂的不同,固相萃取可分为正相固相萃取、反相固相萃取和离子交换固相萃取。 正相固相萃取 正相固相萃取所用的吸附剂是极性的，目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用，从而使溶解于非极性溶剂中的极性物质在吸附剂表面吸附、富集。 其极性作用包括了氢键、π-π键相互作用、偶极-偶极相互作用和偶极-诱导偶极作用等。 反相固相萃取 反相固相萃取所用的吸附剂和目标化合物通常是非极性的或较弱极性的，反相萃取过程中目标物质的碳氢键与吸附剂表面官能团产生非极性作用(包括范德华力或色散力),使得极性溶剂中的非极性以及弱极性的物质在吸附剂表面吸附、富集。 离子交换固相萃取 离子交换固相萃取又可分为强阳离子固相萃取和强阴离子固相萃取两种,作用机理都是目标物质的带电荷基团同吸附剂表面的带电基团发生离子静电吸引,从而实现吸附分离。 固相萃取的分类 按照操作的不同,固相萃取可分为离线萃取和在线萃取。 离线萃取是指萃取过程完成后再使用一些分析手段进行分析;在线萃取出现于80年代,萃取和分析同步完成,可靠性、重现性、以及操作性能和工作效率都得到很大程度的提高。 四、固相萃取的操作步骤 典型的固相萃取一般分为四个基本步骤： 1、吸附剂的选择 目标物的最佳保留（即最佳吸附）取决于目标物极性与吸附剂极性的相似程度，两者极性越相似，则保留越好（即吸附越好）。 选择固相萃取中的固定相吸附剂时，要尽量选择与目标物极性和样品溶剂极性相似的吸附剂。 当目标物极性适中时，正、反相固相萃取都可使用。 吸附剂的选择还受样品溶剂洗脱强度的制约。 在选择固相萃取分离模式和吸附剂时，要考虑以下几点： ①目标物在极性或非极性溶剂中的溶解度； ②目标物有无可能离子化，从而决定是否采用离子交换固相萃取； ③目标物有无可能与吸附剂形成共价键，如果能形成共价键，再洗脱时有可能会遇到麻烦； ④非目标物与目标物在吸附剂上的竞争程度，这关系到目标物与干扰化合物能否很好地分离。 2、吸附剂的活化 3、上样 4、洗涤和洗脱 先用较弱的溶剂将弱保留的干扰化合物洗掉，再用较强的溶剂将目标物洗脱下来加以收集。 方法:真空或离心 将淋洗液或洗脱液流过吸附剂．在多数情况下，使目标物保留在吸附剂上，最后用强溶剂洗脱，更有利于样品的净化． 在选择对目标物吸附很弱或不吸附，而对干扰化合物有较强吸附的吸附剂时，可先让目标物淋洗下来加以收集，让干扰化合物保留在吸附剂上，从而实现两者的分离。 五、固相萃取应用 固相萃取可用于环境化学、食品、医药卫生、临床化学、生物化学、法医学等领域中复杂目标物样品微量或痕量的分离、富集和分析，具有非常广泛的应用。 固相微萃取(Solid?phase?Micro-Extraction??SPME) 固相微萃取是在固相萃取基础上发展起来的,吸收了固相萃取的优点,摒弃了其需要柱填充物和使用溶剂洗脱解吸附的弊病,只要一支类似进样器的固相微萃取装置即可完成全部前处理,通过色谱进样口提供能量完成解吸附和进样 。 优点:萃取、净化、浓缩、进样功能于一体,具有操作简单、所需时间短、无需溶剂、用样量少、选择性强、容易实现自动化以及易于与色谱、电泳等高效分离检测手段联用等 与SPE法相比，SPME法具有萃取相用量更少、对待测物的选择性更高、溶质更易洗脱等特点 原理 SPME的萃取机制就是待测物的样品基质和萃取介质（涂层）间的分配。固相微萃取装置由在微量进样器中插入一段涂有萃取相的石英纤维构成，当萃取达到平衡时，进入萃取相的分析物的量为： N=KfsV1CoV2/（KfsV1+V2） 其中，Co为萃取前分析物在样品中的浓度；Kfs为分析物在萃取相和试样间的分配系数； V1 为萃取相的体积；V2为样品的体积。 SPME对有机物的萃取符合“相似相溶”原则，不同的涂层萃取不同的待测物。非极性涂层如聚二甲基硅氧烷(PDMS)，对非极性物质如烃类效果良好；极性涂层如聚丙烯