市公开课动物细胞融合与单克隆抗体彭金刚第5稿要点.ppt

欢迎光临广州市铁一中学！ 模拟单克隆抗体的制备过程 每4人一组利用细胞模型，完成模拟制备流程。 谢谢！欢迎指正！ * * 荧光标志的小鼠细胞和人细胞融合实验示意图 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 选修3专题2 细胞工程 执教 广州市铁一中学 彭金刚 1.1 概念 动物细胞融合也称细胞杂交。是指_________ 动物细胞结合成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为________。 一、动物细胞融合 两个或多个 杂交细胞 1.3 融合过程 融合的原理？ 灭活的含义？ 两两融合后可产生几种杂交细胞？ 1.2 融合手段 ________(PEG)、________ 、电激等 聚乙二醇 灭活的病毒 突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 其中最有价值的应用是制备单克隆抗体。 1.4 意义与应用 《蓝猫 单克隆抗体及生物导弹》 思考：制备单克隆抗体运用了什么技术？ 单克隆抗体的优点？ 抗体由什么细胞产生的？ 获得抗体的传统方法是什么？有何缺陷？ 二、单克隆抗体 产量低、纯度低、特异性差 问题2 问题1 抗体由什么细胞产生的？ 获得抗体的传统方法是什么？有何缺陷？ 二、单克隆抗体 如何才能让B淋巴细胞产生单一大量抗体？ 产量低、纯度低、特异性差 → 细胞群 问题2 问题3 问题1 单 克 隆 抗 体 一个 B淋巴细胞 克隆 → 抗体 什么细胞可以无限增殖？ 如何才能将两种细胞的特点结合起来？ 1975年，米尔斯坦和柯勒 1984年，诺贝尔生理学或医学奖。 问题4 问题5 骨髓瘤细胞 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 分泌抗红细胞抗体的B淋巴细胞 分泌抗红细胞抗体的杂交瘤细胞 其他杂交瘤细胞 注射羊 红细胞 为什么注射羊红细胞？ 获到的B淋巴细胞有哪些类型？ 细胞两两融合后，产生几种融合细胞？ 如何把杂交瘤细胞筛选出来？ 杂交瘤细胞有何特点？ 如何选出分泌抗红细胞抗体的细胞群？ 如何得到大量单克隆抗体？ （第二次筛选） 如何得到大量杂交瘤细胞？ （第一次筛选） 二、单克隆抗体的应用 欢迎两位学生 为我们分享单克隆抗体的应用！ 单克隆抗体有何特点？ 特异性强、灵敏度高，可大量制备。 （传统抗体）特异性差、 纯度低、 产量低。 动物 细胞融合 动物细胞A 动物细胞B _____细胞 细胞______ _____法 诱导 杂种 培养 物理 化学 生物 改变 _________，产生新性状 相同 培养杂交细胞，生产_________ 杂种细胞经组织培养后获得_________ 不同 结果 用胰蛋白酶或 _________ 处理使细胞分散后诱导 细胞融合 用纤维素酶 和_______去除细胞壁后，诱导 原生质体融合 不同 处理 方法 生物法( _________ ) 不同 物理法(离心 振动 电激 等) 化学法 ( _______ ) 相同 诱导 手段 细胞的_______ 植物细胞的______性 不同 细胞膜的流动性 相同 理论 基础 动物细胞融合 植物体细胞杂交 动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较 全能 增殖 聚乙二醇PEG 灭活的病毒 果胶酶 胶原蛋白酶 细胞产品 杂种植物 遗传物质 二 单克隆抗体 已免疫的 B淋巴细胞 ______细胞 B-B细胞 融合 _____细胞 _____细胞 杂交瘤细胞 ______ 克隆化培养和_______ 分泌特定抗体 的杂交瘤细胞 ________ 或_________ 大量单 克隆抗体 瘤-瘤 B-瘤 选择性 培养基 抗体检测 体外培养 骨骼瘤 小鼠体内 习题：金榜P43 彭金刚285635783 *